.../μl。作者在英皇家研究生院Polak教授实验室应用于放射性标记cRNA探针的浓度为0.5ng/μl,而在非放射性标记(生物素或地高辛)cRNA探针浓度为2.5ng/μl,放射性标记DNA探针浓度为1.0ng/μl。向正华等应用地高辛标记...
...核酸分子杂交技术 二、原位杂交组织化学技术的由来及发展 三、原位杂交组织化学技术的基本方法 第二节 cRNA探针在原位杂交组织化学(ISHH)中的应用 一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学...
... cRNA探针在原位杂交组织化学(ISHH)中的应用 一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用 三、地高辛标记cRNA探针的应用 第三节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的...
...内质网上。下面列举几种代表性的电镜原位杂交技术。一、应用同位素标记cRNA探针电镜原位杂交技术于染色体制片(Hutchison et al,1982)(1)将整封染色体铺片放置于金网上,在70%的酒精蒸汽固定4~15h,空气干燥。(2)以强碱...
...需要的37℃,因此,建议对盖片应用前在37℃进行预热。(3)用免疫细胞化学或组织化学方法显示荧光标记。自80年代以来,荧光素标记检测系统日益增加。包括:①生物素标记探针与荧光素标记的抗生物素(avidin)或抗生物素抗体。②氨乙酰基荧光(...
...125I半衰期为60天),3H的半衰期长达12.3年,但它所释放β射线的能量太低,只能用于组织原位杂交。由于同位素标记的探针在使用过程中存在着上述缺点,近年来,人们在寻找非放射性标记物方面取得了很大进展。国内已具备生物素类标记物的生产能力,并...
...继后不少科技工作者在这方面做了大量的工作(Manning et al 1975,Steinert et al1976,Hutchison et al 1982)。但所应用的均是同位素标记核酸探针,直到1986年Binder首先用生物素标记的...
...近年,不少科技工作者将原位杂交组织细胞化学技术(ISHH)应用于细胞分裂中期(Metaphase)和分裂间期(Interphase)的染色体铺片上,利用标记的核苷酸探针与之进行杂交,可在光镜或电镜水平检测到不同的特异性的标记物。目前,...
...利用这一方法,应用32P和生物素标记的核酸探针分别对导致人体免疫缺陷的HIV-1/AIDS病毒DNA的单个拷贝基因经PCR扩增后在外周血单核细胞内显示成功。就算此法对HIV-1感染患者外周血单核细胞检测的阳性率明显高于用单纯原位杂交技术的...
...Southern印迹杂交中应用,其特异性和灵敏性较高,价廉易购,国内已有试剂盒供应,军事医学科学院放射医学研究所马立人教授等研制和生产的光敏生物素核酸探针和检测试剂盒使用良好。方法步骤:在一灭菌Eppendorf管中加待标记DNa 5μg/...
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