...多聚酶作用下,使四种脱氧核苷按模板3ˊ端引物向5ˊ端延伸DNA链,经20~40个循环,可使1个拷贝的核酸扩增至106以上,经琼脂糖电泳,可见到溴化乙锭染色的核酸条带,扩增片段的大小取决于两引物的间距。此法较核酸杂交敏感、快速,已用于肝炎、...
...新华社北京10月31日电(记者李斌、吴晶晶)核酸干扰技术(RNAi)是近年来蓬勃发展的生物前沿技术。中国科学院生物物理研究所的科学家利用这一技术在动物身体上对乳腺癌实施治疗,取得了显着效果。这一研究成果近日发表在国际核心期刊《癌基因治疗》...
...RFLP分析是限制性内切酶、核酸电泳、印迹(blot)技术、探针-杂交技术的综合应用,多用于临床遗传性疾病的基因诊断。基本原理是遗传性疾病多有基因的缺陷,如基因缺失、基因插入、编码区小范围核苷酸序列改变或点突变等。前二者可将纯化的正常人和...
...大大增加,被扩增的目的片段也能保持很高的正确程度。5.对原始材料质量要求低由于PCR技术有较高的灵敏度和特异性,故仅含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者总RNA,就可以用做反应起始材料来获取目的产物。部分降解的DNA材料也可以通过...
...提高pH值来实现。使单链聚合双链的过程称为退火或复性。用分子杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素或非同位素标记成为探针,再与另一种核酸单链进行分子杂交。核酸杂交技术基本上是Hall等1961年的工作开始的,探针与靶序列...
...xSSC,室温1小时。载玻片浸在缓冲液中。显色(试剂、方法参照斑点杂交的封闭-显色部分)20分钟-2小时,显微镜下观察结果。二、核酸扩增技术通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒,也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法,是在90年代才开展...
...浸润细胞免疫表达 一、T淋巴细胞及其亚群的免疫表达 二、B淋巴细胞和免疫球蛋白的表达 三、其它 第八节 汗腺及汗腺肿瘤的免疫细胞化学特点 参考文献 第十八章 核酸分子杂交技术概述 第一节 核酸的分子结构 一、核酸的化学组成 二、核酸的一级...
...进行,结合的特异性大大增加,被扩增的目的片段也能保持很高的正确程度。5.对原始材料质量要求低由于PCR技术有较高的灵敏度和特异性,故仅含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者总RNA,就可以用做反应起始材料来获取目的产物。部分降解的...
...原位杂交组织(或细胞)化学技术简称原位杂交(In situhybridization),如上所述,属于固相核酸分子杂交的范畴。但它区别于固相核酸分子杂交中的任何一种核酸分子杂交技术。菌落杂交系细菌裂解释放出DNA,然后进行杂交。...
...多聚酶链反应 多聚酶链反应(Poly-merasechain reaction,PCR)实际上是一种核酸片段体外扩增试验。做这一试验的先决条件是首先必须弄清楚某一基因的核苷酸序列然后人工合成其中两个特异性处段(其长度以15—30个碱基为宜...
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