光敏生物素标记核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

光敏生物素有一个连接臂,一端连接生物素,另一端有芳基叠氮化合物。在可见光照射下,芳基叠氮化合物可能变成活化芳基硝基苯,很易与DNA或RNA的腺嘌呤N—7位置特异结合,大约每50个碱基结合一个生物素,所以只用于标记大于200个核苷酸的片段。光敏生物素的醋酸盐很易溶于水,与核酸形成的共价结合很稳定。此法有以下优点:方法简便易行,快速省时,不需昂贵的酶和dUTP等...

http://qihuangzhishu.com/969/520.htm

生物素化的RNA探针标记_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...也没有互补链的干扰,与靶基因杂交比DNA探针更稳定。Bio-11-dUTP可通过Sp6、T 3 和T 7 RNA聚合酶掺入到RNA转录子中。标记方法:其下列反应体积为50μl:40mmol/l Tris HCl pH8.0、8mmol/l MgCl 2 、2mmol/L亚精胺、25mmol/l NaCl, 1mmol/L每一ATP、GTP、GTP,1mmol...

http://qihuangzhishu.com/969/528.htm

生物素随机引物标记探针方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...至48μl,加DNA聚合酶(SABC)8u,混匀,37 ℃ ,2h,加0.5mol/l EDTA(Ph8.0)2μl,终止反应。 在随机引物标记体系中,加入不同梯度浓度比值的Bio-11-dUTP/dTTP(%),发现二者比值明显影响探针标记率和显色灵敏度。Bio-11-Dutp/dTTP(%)比值为35%时,其标记率最高,显色灵敏度达0.2pg,杂交灵敏度...

http://qihuangzhishu.com/969/524.htm

生物技术

生物技术(biotechnology),有时也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础科学的科学原理,采用先进的科学技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。 因此,生物技术是一门新兴的,综合性的学科。 业务培养要求 本专业学生主要学习生物技术方面的基本理论、基本知识,受到应用基础研究和技术开发方面的...

http://zhongyibaodian.net/a/121957.html

生物技术

生物技术(biotechnology),有时也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础科学的科学原理,采用先进的科学技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。 因此,生物技术是一门新兴的,综合性的学科。 业务培养要求 本专业学生主要学习生物技术方面的基本理论、基本知识,受到应用基础研究和技术开发方面的...

http://zhongyibaodian.net/a/123383.html

生物技术

生物技术(biotechnology),有时也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础科学的科学原理,采用先进的科学技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。 因此,生物技术是一门新兴的,综合性的学科。 业务培养要求 本专业学生主要学习生物技术方面的基本理论、基本知识,受到应用基础研究和技术开发方面的...

http://zhongyibaodian.net/a/145086.html

生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)光敏生物素标记cRNA探针的应用 以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20cm处照射30min。用仲丁醇抽提游离生物素,再用丁醇沉淀回收光敏生物素cRNA探针,将其溶于适量的灭菌双蒸水,用紫外分光...

http://qihuangzhishu.com/969/540.htm

缺口平移法标记生物素DNA探针(二步法)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...min;三蒸水补足体积至49μl,DNA聚合酶i 5u,混匀,14℃过夜,加0.5mmol/l ED-TA(Ph8.0)1μl终止反应。 已标记探针的提纯:10mg/ml tRNA 2μl,10mmol/L Tris –HCl (pH7.5)150μl,2.5倍体积的95%乙醇,置液氮中15min或-20℃过夜。15000r/min,离心10min,真空干燥...

http://qihuangzhishu.com/969/523.htm

生物素-α-氨基乙酸-N-羟基琥珀标记化学修饰的DNA法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

此法是在亚硫酸盐催化下,生物素酰肼可置换寡核苷酸探针中胞嘧啶上的氨基,使生物素结合到DNA分子上而制成生物素化DNA探针。此法优点是采用通用试剂和技术,检出敏感。Vicied 等人指出DNA和RNA中胞嘧啶N-4位置在亚硫酸氢盐存在下可用乙二胺连接臂修饰,此过程也可能介导C-6位的磺酸盐组分。在合适的条件下,可有3%~4%的碱基被修饰。新鲜配制亚硫酸氢钠-乙...

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泛酸与生物素_《临床营养学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

B族维生素中尚有泛酸及生物素,它们具有很重要的生理功能,但由于来源广泛,人体未发现有典型的缺乏病例。 5.13.1 泛酸 泛酸是丙氨酸藉肽键与α,γ-二羧-β-β-二甲基丁酸缩合而成,它是辅酶A(CoA)及酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)的组成部分。机体内的泛酸,几乎都用以组成辅酶A及ACP的辅基,其构造式如图5-34。 图5...

http://qihuangzhishu.com/1002/43.htm

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