...与转化细胞的DNA进行分子杂交，可以直接筛选和鉴定目的序列克隆。常用的方法是将转化后生长的菌落复印到硝酸纤维膜上，用碱裂菌，菌落释放的DNA就吸附在膜上，再与标记的核酸探针温育杂交，核酸探针就结合在含有目的序列的菌落DNA上而不被洗脱。核酸...
...之前必须对它的特异性，敏感性进行鉴定。鉴定举例，用阳性抗原片，脱蜡至水，胰蛋白酶消化，加第一抗体（多克隆或单克隆），一般过夜再加标记抗同一抗特异性抗体结合的胶体金溶液（多克隆或单克隆抗体标记的胶体金）详细方法步骤见后IgGS法，一般做1：2...
...在RIA中，标记抗原质量的优劣，直接影响测定结果，必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原，并保持免疫活性不受丧失。...
...很多，而常用的方法包括四个步骤即：①分离脂蛋白；②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLDL等；③将各种载脂蛋白进一步纯化而获得免疫纯或单点纯；④鉴定或定量。...
...试剂（Bolton和Hunter试剂）法 三、放射性标记化合物的纯化与鉴定 ◦ （一）纯化标记化合物的常用方法 ◦ （二）标记化合物的主要质量指标 第三节 结合和游离部分的分离 一、对分离方法的要求 二、常用的分离方法 第四节 样品的前处理...
...上述各种方法制备酶标抗体时，除产生酶标抗体外，还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降，故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1．多聚体的分离实验中，不同的试剂形成的多聚体的数量各异，...
...很多，而常用的方法包括四个步骤即：①分离脂蛋白；②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLDL等；③将各种载脂蛋白进一步纯化而获得免疫纯或单点纯；④鉴定或定量。...
...放射性碘标记 一、同位素的选择 二、蛋白质与多肽激素的放射性碘标记 （一）氯胺T法 （二）乳过氧化物酶法（LPO） （三）Iodogen碘化法 （四）酰化试剂（Bolton和Hunter试剂）法 三、放射性标记化合物的纯化与鉴定 （一）纯化...
...放射性。但此法只能用于标记含酪氨酸的化合物。此外，含酪氨酸的残基如具有蛋白质的特异性和生物活性，则该活性易因标记而受损伤。间接标记法（又称连接法）是以125I标记在载体上，纯化后再与蛋白质结合。由于操作较复杂，标记蛋白质的比放射性显著低于直接...
...用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果1．免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100～10-7系列稀释的抗原，斑点直径0.25cm, 空气中干燥，80℃多聚甲醛蒸气固定1h，然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥...
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