...研究,在这种情况下,探针和靶链在溶液中的浓度相同。现代杂交实验无论在液相杂交还是固相杂交均在探针过剩的条件下进行,此外,固相杂交中靶序列不在液相,故其浓度不能精确计算。因此,本文不讨论通常用于杂交反应的传统二级速率公式,而叙述一级动力学公式。...
...置于计数器上进行放射性计数。(2)亲合吸附杂交:生物素标记DNA探针与溶液中过量的靶RNA杂交,杂交物吸附到酰化亲合素包被的固相支持物(如小球)上,用特异性抗DNA:RNA杂交物的酶标单克隆抗体与固相支持物上的杂交物反应,加入酶显色底物,这个...
...部分序列的全长cDNA进行分子克隆,建立全长的DNA探针。适用于基因游走、转位因子和已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。图22-2 反向PCR原理示意图波浪线代表靶DNA,方块代表测翼序列,▲和△代表限制酶切位点,寡核苷酸引物与模板...
...双链过程称为退火或复性。用分子杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素标记成为探针,再与另一种核酸单链进行分子杂交。(三)探针——靶分子反应从化学和生物学意义上理解,探针是一种分子,它带有供反应后检测的合适标记物,并与特异靶...
...因而易用T4噬菌体多核苷酸激酶进行磷酸化反应,而将α-32P从[γ-32P]ATP转移至其5’端。这种磷酸化反应最多能使每一寡核苷酸分子中掺入一个32P原子。2)用大肠杆菌DNA聚合酶i Klenow片段标记合成的寡核苷酸探针,其比活性更高,...
...mmol/L EDTA, pH8.0)10min终止反应,甲绿复染5min,二甲苯透明,DPX封固,镜检。(二)荧光标记DNA探针的应用1.概述在原位杂交细胞化学中荧光标记DNA探针(Fluorescence in situ DNA ...
...轡革也。从革巴聲。必駕切 (靶) 轡革也。王褒傳。王良執靶。音義或曰。靶音霸。謂轡也。吳都賦。迴靶乎行邪睨。劉曰。靶、轡革也。按云轡革者、毛傳云革轡首也。从革。巴聲。必駕切。古音在五部。...
...探针及细胞内靶DNA变性,解离成单链,迅置于冰上冷却。然后置于37℃~42℃杂交过夜。(2)RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景,因此,在操作步骤中省略此步。(一)地高辛-碱性磷酸酶(Dig -AKP)标记DNA探针在石蜡包埋切片检测病毒DNA...
...因而易用T4噬菌体多核苷酸激酶进行磷酸化反应,而将α-32P从[γ-32P]ATP转移至其5’端。这种磷酸化反应最多能使每一寡核苷酸分子中掺入一个32P原子。2)用大肠杆菌DNA聚合酶i Klenow片段标记合成的寡核苷酸探针,其比活性更高,...
...《唐韻》《集韻》《韻會》《正韻》𠀤必駕切,音灞。《說文》轡革也。《爾雅·釋器》轡首謂之革。《註》轡靶革。《疏》字林云:靶,轡革也。 又《爾雅·釋器》輿革前謂之鞎。《註》以韋靶車軾。《疏》靶,謂鞔也。...
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