...一、荧光抗体的制备（一）抗体的荧光素标记用于标记的抗体，要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团...
...纯化①用适当的凝胶层析柱如SephadexG—200、Saphacryl—300层析法将游离的凝集素、游离的过氧化物酶和高分子量的成分从结合物分离出去，包括抑制性的糖也在此时分离出去。②提纯后的结合物在280nm和403nm波长处测量其吸光...
...酶标抗体与荧光色素标记抗体不同，它需借助桥-偶联剂的作用，将酶连结在抗体分子上。偶联剂是一种双功能试剂，具备3个基本特征：①偶联剂与抗体和酶之间的连结，必须是不可逆的，即借共价键连结；②偶联剂不应影响酶和抗体的活性；③不能因偶联剂的加入，...
...也可引起回忆性抗体反应。 检测AIAb的方法有ELISA法、免疫斑点法等，现介绍ELISA法：操作步骤 用纯化人、猪或牛结晶胰岛素进行包被，待测血清作l：10稀释，再加最适量工作浓度的HRP标记抗人IgC抗体或标记的抗人IgA的F(ab’)...
...球蛋白的溶液离心（2500r/min）20min，除去其中少量之沉淀物，装入透析袋中后再置于烧杯中，用pH8.0缓冲盐水透析（0～4℃）过夜。⑤过柱：取透析过夜的标记物，过葡聚糖凝胶G-25或G-50柱，分离游离荧光素，收集标记的荧光抗体进行...
...性抗体反应。 检测AIAb的方法有ELISA法、免疫斑点法等，现介绍ELISA法：操作步骤 用纯化人、猪或牛结晶胰岛素进行包被，待测血清作l：10稀释，再加最适量工作浓度的HRP标记抗人IgC抗体或标记的抗人IgA的F(ab’)：，加底物...
...用于软组织肿瘤可在石蜡切片表达的抗体已有多种，请参见表12-1。表12-1 软组织细胞可用的标记抗体抗原名称标记细胞（1）角蛋白（Keratin）上皮与肌上皮细胞（2）波纹蛋（Vimentin）间叶分化细胞、内皮细胞（3）结蛋白（...
...金标法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时，在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色，不需加外进行染色。在电镜...
...讲，可以制备单克隆抗Id和多克隆（免疫血清）抗Id。表9-1 不同宿主免疫系统识别的抗体决定簇及抗独特型抗体的制备受体动物（应答者）提供Ab1的动物（刺激者）Ab1分子上的抗原决定簇类型产生Ab2的类型家兔BALB/c小鼠同种型抗同种型 ...
...应逐滴加入，1mg的蛋白质大约5min加完。（3）在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白（BSA）使其终浓度为1%，或加入3%聚乙二醇（PEg MW20000）使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果，BSA稳定的标记...
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