...．标记液△：生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※：为检测标记率而加。2．转录标记终止液（1）0.2mol/L EDTA：用于地高辛标记法（2）生物素标记终止液：（四）DNA探针标记常用试剂的配制（1）10 ×缺口平移缓冲液...
...Tris缓冲液pH7.4、含1%BSA和2%Tween20 稀释，简称TBT缓冲液）室温30min。④以滤纸吸去多余液体，覆于特异性第一抗体1：500（Tris 缓冲液，pH7.4,含1%BSA和0.1%叠氮钠）4℃，孵育过夜⑤彻底清洗，...
...的光在特定的仪器上进行测定。两种常用的标记酶，辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）均有其发光底物，由此建立的CLEIA均在临床检验中应用。（一）HRP标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺或其衍生物。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行，...
...（1）Rh抗血清：常用的为IgＧ抗D、抗Ｃ、抗Ｅ、抗ｃ、抗ｅ。其效价标准大致如：抗Ｄ不低于64，抗Ｅ不低于16，抗Ｃ不低于16，抗ｃ不低于16。 （2）5％受检者红细胞盐水悬液。 （3）1％木瓜酶（或菠萝酶〕溶液：称取木瓜酶1.0克溶解于...
...研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）的化学性质，并根据需要来选择适宜的固定剂（或固定方法）以及改进固定条件。目前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此，简要介绍几种目前较为常用和...
...DNA片段，连接缓冲液及T4连接酶适量至总体积为20μl，在12～14℃反应12～16h。（8）连接反应液可置-20℃保存，供转化用。（9）关于待插入DNA片段的获得参见附注。（二）大肠杆菌感受态的制备及重组DNA的转化1．感受态的制备（1...
...穿透性，使标记抗体液进入细胞内。2．免疫反应处理 常用包埋前染色，分直接法和间接法两种。在染色前，将组织切成约10～20μm厚的薄片。（1）直接法：将薄片直接浸泡于标记抗体液中，室温或37℃作用1～2h或更长；缓冲液（有人提倡用冷缓冲液）浸漂，...
...SPA可为多种示踪物如荧光素、酶、胶体金、铁蛋白等所标记，应用较广的为酶标记SPA和金标记SPA技术，后者将在第七章 中叙述。标记SPA常用的酶为HRP。可应用于间接法。SPA在PAP法中可代替桥抗体。1．SPA—HRP用于间接法的...
...目前用于放射免疫测定中的分离方法很多，各有其优缺点，下面介绍几种常见的分离方法：（1）吸附分离（固相颗粒）活性碳吸附剂（目前常用）硅镁吸附剂（滑石粉等）交换树脂吸附剂（2）蛋白沉淀剂硫酸铵、硫酸钠聚乙二醇（PEG）（目前常用）无水乙醇、...
...100ml电磁搅拌1h，然后置于变通冰箱冰箱待用。（五）缓冲液放射免疫分析技术所用的缓冲液有多种，要通过实验选用抗体和抗原结合最高的缓冲液。目前最常用的缓冲液有下列几种：①磷酸盐缓冲液；②醋酸盐缓冲液；③巴比妥缓冲液；④Tris–HCl缓冲液；...
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