凝胶层析 是按照 蛋白质 分子量大小进行分离的技术，又称之 凝胶 过滤，分子筛层析或排阻层析。单个凝胶珠本身象个"筛子"。不同类型凝胶的 筛孔 的大小不同。如果将这样的凝胶装入一个足够长的柱子中，作成一个凝胶柱。当含有大小不同的蛋白质样品加到凝胶柱上时，比凝胶珠平均孔径小的蛋白质就要连续不断地穿入珠子的内部，这样的小分子不但其运动路程长，而且受到来自凝胶珠内...
◆ 气相层析 属于分配层析或 吸附层析 ，仅适用于分析分离 挥发性 和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物（如磨细的耐火砖）上覆盖一层高沸点液体，如 硅油 、高沸点 石蜡 和油脂、环氧类聚合物。外 涂层 约为支持物重量的20％。分析时操作温度范围，一般从室温到200℃。特殊的层析柱能达到500℃。流动相常用氦、氩或氮为展层气体。气相层析分离的区带十分清晰，是由...
...，放置，如果分层，取用体积大的一层作为展开剂。绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。混合不均匀和没有分液的展开剂，会造成层析的完全失败。各组成溶剂的比例准确度对不同的分析任务有不同的要求，尽量达到实验室仪器的最高精确度，比如：取1ml的溶剂，应使用1ml的单标移液管，移液管应符合计量认证要求，尽管多数时候这不是必须的。 展开系统的饱和 一...
标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下： DEAE-纤维素柱的装柱，洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所需DEAE-纤维素量以干重每克交换20～50mg标记蛋白量为宜。常用梯度洗脱法如下： （1）层析柱用0.01mol/L、pH7.2PB平衡，标记物上柱后，先用0.01mol/L、pH7.2PB洗脱，洗出无色或淡绿色...
除游离荧光素可用2×46cm柱层析法，详细方法参阅第二章 。加入荧光抗体15～18ml（按床体积的5%～10%加样），使其缓慢渗入柱内，待即将全部入柱时，加入PBS少许，关闭下口，停留30～40min ，使游离荧光充分进入细筛孔中，然后再接通洗脱瓶开始滴入洗脱液。加入洗脱液一定量后，荧光抗体即向下移行，逐渐与存留于上端的游离荧光素之间拉开明显的界线，随着大量...
◆ 高效液相层析 （又名 高压 液相色谱） 70年代新发展的层 析法 。其特点是：用高压 输液泵 ，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。用直径约3～10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1～2微米的 二氧化硅 ，经硫酰氯反应生成Si—Cl，进一步连接疏水的烷基，如Si—C18H37，或阳离子交换基团—Si（...
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...化钠溶液，pH7.0洗脱液。 1.3 蓝色葡聚糖2000（2～4mg）加维生素B12（0.2mg），加蒸馏水1ml溶解。 2 仪器 2.1 层析柱（1.5～1.6×100cm）。 2.2 206nm波长紫外监测仪。 2.3 部分收集器及试管。 2.4 凝胶和洗脱液储瓶，适宜的控制装置和记录器。 3 操作 3.1 琼聚糖4B凝胶的漂洗 取琼聚糖4B凝胶约300...
潍坊市新技术研究所实验厂 公司地址 山东省潍坊市潍城区民生西街40号 联系电话 0536-8319455,8321835 传真号码 0536-8319455 电子邮箱 wf_jingcheng@sina.com 邮政编码 261011 公司网址 潍坊市新技术研究所实验厂 潍坊市新技术研究所实验厂位于山东省潍坊市。查询更多位于山东省的制药企业请参看 山东省制药...
...化钠溶液，pH7.0洗脱液。 1.3 蓝色葡聚糖2000（2～4mg）加维生素B12（0.2mg），加蒸馏水1ml溶解。 2 仪器 2.1 层析柱（1.5～1.6×100cm）。 2.2 206nm波长紫外监测仪。 2.3 部分收集器及试管。 2.4 凝胶和洗脱液储瓶，适宜的控制装置和记录器。 3 操作 3.1 琼聚糖4B凝胶的漂洗 取琼聚糖4B凝胶约300...
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