1975年Kohler和Milstein发现将小 鼠骨 髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将...
血细胞发生是造血干细胞经增殖、分化直至成为各种成熟血细胞的过程。造血干细胞(hemoplietic stem cell)是生成各种血细胞的原始细胞,又称多能干细胞(multipotentialstem cell)。造血干细胞在一定的微环境和某些因素的调节下,增殖分化为各类血细胞的祖细胞,称造血祖细胞(hemopoieticprogenitor),它也是一种相...
由于用脾集落法未能证明淋巴细胞的发生,所以造血干细胞与淋巴细胞在发生学的关系,直到60年代Wu等建立了放射诱导染色体标记技术后才逐步得到阐明。 Wu等用照射诱导小 鼠骨 髓干细胞染色体发生一定程度的畸变,做为标记,但又不影响其细胞分裂。将这种细胞输入另一照射小鼠体内后,可以重建其造血和免疫功能。 由于它们具有特殊的畸形染色体,因此在照射宿主体内,任何二种细胞...
杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中,可能会有数个甚至更多的克隆,可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体(特异性抗体)分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开就需要克隆化。克隆化的原则是,对于检测抗体阳性的杂交克隆尽早进行克隆化,否则抗体分泌的细胞会...
多囊蛋白-1(PC1)是表达于发育肾脏肾小管上皮细胞和其他管状结构上的一种膜蛋白。最近的研究表明这种蛋白可能在调节多种类型细胞内Ca(2+)水平方面具有重要作用,但是在肾脏上皮细胞方面尚缺乏资料。 意大利费拉拉大学普通 生物化学与分子生物学 科的Aguiari G及其同事研究了PC1细胞浆段对人类肾脏上皮细胞HEK-293细胞系中储存Ca(2+)通道活性的作...
...必要的,应做下述几个方面的鉴定: 1.抗体特异性的鉴定 除用免疫原(抗原)进行抗体的检测外,还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验,方法可用ELISA、IFA法。例如:①制备抗 黑色素瘤 细胞的McAb,除用黑色素瘤细胞反应外,还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应,以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克...
大量生产单克隆抗体的方法主要有两种: (1)体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞,从一清液中获取单克隆抗体。但此方法产量低,一般培养液内抗体含量为10~60μg/ml,如果大量生产,费用较高。 (2)体内接种杂交瘤细胞,制备 腹水 或血清。 ①实体瘤法:对数生长期的杂交瘤细胞按1~3×107/ml接种于小鼠背部皮下,每处注射0.2ml,共2~4点。待肿瘤达到...
造血祖细胞 : 造血干细胞 在一定的 微环境 和某些因素的调节下, 增殖 分化 为各类 血细胞 的祖 细胞 ,称造血祖细胞(hemo-poietic progenitor),它也是一种相当原始的具有增殖能力的细胞,但已失去多向分化能力,只能向一个或几个血细胞系定向增殖分化,故也称定向 干细胞 (committed stem cell)。 造血祖细胞由造血干细...
一、 造血干细胞 的起源 造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)是存在于造血组织中的一群原始 造血细胞 ,它不是组织固定 细胞 ,可存在于造血组织及 血液 中。造血干细胞在人 胚胎 2周时可出现于 卵黄囊 ,第4周开始转移至胚肝, 妊娠 5个月后, 骨髓 开始造血,出生后骨髓成为 干细胞 的主要来源。在造血组织中,所占比例甚少,如在...
造血干细胞 ( Stem cell , SC )的干,译自英文“ stem ”,意为“树”、“干”和“起源”。类似于一棵树干可以长出树杈、树叶,并开花和结果等。通俗地讲,造血干细胞是指尚未发育成熟的 细胞 ,是所有造血细胞和 免疫细胞 的起源,它不仅可以 分化 为 红细胞 、 白细胞 和 血小板 ,还可跨系统分化为各种组织器官的细胞,具有自我更新、多向分化和...
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