...（一）cRNA探针的同位素标记1．标记液（转录标记）2．转录缓冲液※：用地高辛或生物素标记时，用UTP替代。3．标记终止液4．标记探针水解液先用dH2O悬浮探针，再加入后两种试剂，轻轻振摇混合，于60℃条件下反应。5．探针水解时间注：LO...
...SSC室温冲洗，冲洗后梯度酒精脱水（70%，95%）空气干燥。（6）浸入乳胶膜，应用L-4核乳胶液，水稀释4倍。浸膜后的金网，用胶带固定在载玻片上放在密封的黑色塑料盒内，4℃，时间根据同位素种类和靶mRNA含量而定，也可选择不同时间曝光，根据...
...制约。这类RNA探针主要用于研究目的，而不是用于检测。例如，在筛选逆转录病毒人类免疫缺陷病毒（HIV）的基因组DNA克隆时，因无DNA探针可利用，就利用HIV的全套标记mRNA作为探针，成功地筛选到多株HIV基因组DNA克隆。又如进行中的转录...
...创造了原位杂交细胞或组织化学技术。Orth（1970）应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交，首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位，但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞，探针均采用同位素标记。...
...核酸分子杂交技术 二、原位杂交组织化学技术的由来及发展 三、原位杂交组织化学技术的基本方法 第二节 cRNA探针在原位杂交组织化学（ISHH）中的应用 一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学...
... cRNA探针在原位杂交组织化学（ISHH）中的应用 一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用 三、地高辛标记cRNA探针的应用 第三节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的...
...靶核苷序列和随体的DNA探针，多数为合成的寡核苷酸探针，在应用上采取ISHH和FCM以及免疫组化相结合（有时还结合核型分析）的综合研究法（图21-2），也可用多种标记物显示不同颜色或不同标记在一张切片上同时显示多个染色体的结构或DNA含量...
...变性，解离成单链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤中省略此步。（一）地高辛-碱性磷酸酶（Dig -AKP）标记DNA探针在石蜡包埋切片检测病毒DNA中的应用1．组织前处理...
...125I半衰期为60天），3H的半衰期长达12.3年，但它所释放β射线的能量太低，只能用于组织原位杂交。由于同位素标记的探针在使用过程中存在着上述缺点，近年来，人们在寻找非放射性标记物方面取得了很大进展。国内已具备生物素类标记物的生产能力，并...
...、T4噬菌体两者的环状基因图都已绘成，目前正致力于人类基因图的绘制。人类基因约有5万～10万个，根据第八次国际人类基因定位工作会议，已定位的人类基因总数达1479个。ISHH技术对染色体基因图的研究，是用同位素或生物素、地高辛标记的核酸探针...
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