化学发光反应参与的免疫测定分为二种类型。第一种是以发光剂作为酶免疫测定的底物,通过发光反应增强测定的敏感性;第二种是以发光剂作为抗体或抗原的标记物,直接通过发光反应检测标本中抗原或抗体的含量。
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1.氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化...
一种物质由电子激发态回复到基态时,释放出的能量表现为光的发射,称为发光(luminescence)。发光可分为三种类型:光照发光、生物发光和化学发光。 1.光照发光(photoluminescence)发光剂经短波长入射光照射后进入激发态,当回复至基态时发出较长波长的可见光(见第十七章)。 2.生物发光(bioluminescence)典型例子为 萤火 虫发...
针对目前食品安全监测以及检验检疫部门对微生物快速检测的需求,ATP生物发光法微生物数量快速测定技术由广东省微生物研究所攻关完成,这一被列为广东省重点科技攻关的项目近期通过了由广东省科技厅组织的成果鉴定。 据介绍,微生物数量检测是微生物分析检测中的重要项目,传统的方法需进行长时间微生物培养,检测周期长,检测条件要求较高,不能满足食品、药品及化妆品企业进行生产质...
化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定(chemiluminescentimmunoassay,CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。用作标记的化学发光剂应符合以下几个条件:①能参与化学发光反应;②与抗原或抗体偶联后能形成稳定的结合物试剂;③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力;④应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫活性...
从标记免疫测定来看,化学发光酶免疫测定(chemiluminescentenzymeimmunoasssay,CLEIA)应属酶免疫测定。测定中2次抗原抗体反应步骤均与酶免疫测定相同,仅最后一步酶反应所用底物为发光剂,通过化学发光反应发出的光在特定的仪器上进行测定。两种常用的标记酶, 辣根 过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)均有其发光底物,由此建立的C...
生物发光 (bioluminescence)是指生物体发光或生物体提取物在实验室中发光的现象。它不依赖于有机体对光的吸收,而是一种特殊类型的 化学发光 ,化学能转变为光能的效率几乎为100%。也是氧化发光的一种。生物发光的一般机制是:由 细胞 合成的化学物质,在一种特殊酶的作用下,使化学能转化为光能。自然界具有发光能力的有机体种类繁多。一些 细菌 和高等 真...
在电化学发光免疫测定(electrochemluminescenceimmunoassay,ECLI)中应用的标记物为电化学发光反应的底物三联吡啶钌,其衍生物N-羟基 琥珀 酰胺(NHS)酯可通过化学反应与抗体或不同化学结构的抗原分子结合,制成标记的抗体或抗原。ECLI的测定模式与ELISA相似,分二个步骤进行。以双抗体夹心法测定抗原为例,第一步在试管中进行...
化学发光 是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和 辐射 。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的 分子 吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,故称直接化学发光。...
将 免疫学 方法( 抗原抗体 特异结合)与 荧光标记 技术结合起来研究特异 蛋白 抗原 在细胞内分布的方法。由于 荧光素 所发的荧光可在 荧光显微镜 下检出,从而可对抗原进行 细胞定位 。 技术原理 免疫荧光 细胞化学 是根据 抗原抗体反应 的原理,先将已知的抗原或 抗体 标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种 荧光抗体 (或抗原)作为 分子 探针 检查 细胞...
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