（一）缓冲液的配制 （1）0.05mol/l pH7.4 TBS 配制 Tris（三羟甲基胺基甲烷）12.1g NaCl 17.5g 加双蒸水1900ml 然后用浓HCL调至pH为7.4再加双蒸水至2000ml Tris 4.84g NaCl 17.5g BSA 2.0g NaN 3 1.0g 双蒸水1900ml,充分搅拌至溶质完全溶解,用浓HCl调pH至8...
采用酶偶联法测定酶活性浓度时，反应体系必须加入指示酶，有些方法还加用辅助酶，在选择或设计此类方法时，必须考虑合适的酶和浓度，有关问题将在后面“连续监测法酶活性浓度”一节中详加讨论。
酶反应介质的pH可影响酶分子，特别是活性中心上必需基团的解离程度和催化基团中质子供体或质子受体所需的离子化状态，也可影响底物和辅酶的解离程度，从而影响酶与底物的结合。只有在特定的pH条件下，酶、底物和辅酶的解离情况，最适宜于它们互相结合，并发生催化作用，使酶促反应速度达最大值，这种pH值称为酶的最适pH(optimum pH)。它和酶的最稳定pH不一定相同，...
这一项包括几种因子，其中最重要的是底物种类和浓度，这是每种测酶活性浓度方法中首先需要选择的项目，选择恰当与否，对该酶测定至关重要。后面几项则不是每种酶测定都会遇到的选择。 （一）选合适的底物种类和浓度 如所测的酶专一性不强，可作用于多种底物，首先就需决定选择哪一类底物作为测此酶的底物。如该项酶测定主要用于临床诊疗工作，则首先应考虑选有较高诊断价值的底物。例如...
标题 缓冲液 附录序号 附录ⅩⅤ 内容全文 D. 缓冲液 枸橼 酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0) 甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。 乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。 取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml，混合，摇匀，即得。 氨－氯化铵缓冲液(pH8.0) 取氯化铵1.07...
磷酸盐缓冲液 (PBS) pH=7.4，与人体 血液 等渗，主要成分为 磷酸氢钠 、 磷酸二氢钠 、 氯化钠 以及 氯化钾 。 储存液 磷酸二氢钾 34g 1mol/L 氢氧化钠 溶液 175mL 蒸馏水 825mL pH7.2 制法 先将 磷酸盐 溶解于500mL蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000mL。 稀释液 ：取储...
用于PCR的标准缓冲液见PCR操作范例。于72℃时，反应体系的pH值将下降1个单位，接近于7.2。二价阳离子的存在至关重要，影响PCR的特异性和产量。实验表明，Mg 2+ 优于Mn 2+ ，而Ca 2+ 无任何作用。 1．Mg 2+ 浓度Mg 2+ 的最佳浓度为1.5mmol/L(当各种dNTP浓度为200mmol/L时)，但并非对任何一种模板与引物的结合都...
在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各...
免疫细胞化学中应用的缓冲液种类较多，即使是同种缓冲液，其浓度、pH、离子强度等也常常不同。在此介绍几种最常用的缓冲液的配制。 1．0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液（PhosphateBuffer, PB） 试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O 配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的N...
...新常数K w ，则 ［H 3 O + ］［OH - ］=K w K w 称为水的离子积常数，简称水的离子积。上式表示在一定温度时，水中氢离子浓度与氢氧离子浓度的乘积为一常数（表3-1）。25℃时，由实验测出在纯水中［H3O+］和［OH-］各为1.0×10-‑7mol.L-1。通常将水合离子H3O+简写为H+，这样，在常温时： 表3-1 不同湿度时水的离子积 ...
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