...原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。...
...自1969年以来,我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的...
...是组织细胞已经合成的物质(过去时),本身不能说明阳性组织细胞目前的功能状态,亦无法预测细胞将合成何种物质,发挥什么功能,因此,单纯的ICC法存在着被动性。近年来,ICC法与原位杂交技术结合,使细胞内活性DNA可视化,直接显示某染色体上,何种...
...预处理、预杂交、杂交和杂交后冲洗的方法同概述中基本方法一节 。光敏生物素核酸探针原位杂交组化程序:(1)石蜡切片脱蜡入水后,置0.1mol/l PBS pH7.2冲洗5min;冰冻切片直接入PBS冲洗5min。(2)0.1mol/l 甘氨酸...
...显示方法有二种:一种是用HRP显示,类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法,利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平的厚片原位杂交免疫细胞化学染色,其步骤与第二十章 叙述的原位杂交免疫细胞化学基本方法相同,只是为了减少细胞微细结构的损伤...
...原位杂交免疫细胞化学技术存在的难点之一是实验手续繁琐,实验周期长。国外Liesi等(1986)和国内学者何彬等应用光敏生物素-链亲合素(Biotin-streptavidin)胶体金系统进行原位杂交,得到了快速满意的结果,全部实验可在数...
...核酸分子杂交技术 二、原位杂交组织化学技术的由来及发展 三、原位杂交组织化学技术的基本方法 第二节 cRNA探针在原位杂交组织化学(ISHH)中的应用 一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学...
...十二、用聚合酶链反应标记高活性DNA探针 第五节 寡核苷酸探针的制备 参考文献 第二十章 原位杂交组织化学 第一节 原位杂交组织化学概述 一、核酸分子杂交技术 二、原位杂交组织化学技术的由来及发展 三、原位杂交组织化学技术的基本方法 第二节...
...PBS的储备液,2×PBS和1×PBS可用DEPC水稀释获得。除用DEPC水配制PFA外,也有用灭菌蒸馏水或经DEPC处理的0.01~0.1mol/L的PBS配制的,方法及注意事项同上。4% PFA是目前原位杂交组织化学技术中最常用的固定液,...
...和免疫细胞化学技术密切结合,发展为杂交免疫细胞化学技术。不同的免疫细胞化学技术,各具有独特的试剂和方法,但其基本技术方法是相似的,都包括抗休的制备,组织材料的处理、免疫染色、对照试验、显微镜观察等步骤。还有双重和多重标记技术也有重要的用途。...
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