...效果佳。在取材方面，免疫电镜技术较光镜免疫化学技术要求更迅速、精细。二、免疫染色分为包埋前染色、包埋后染色和超薄切片免疫染色三种。1．包埋前染色 即先行免疫染色，在解剖显微镜下将免疫反应阳性部位取出，修整成小块，按常规电镜方法处理，经锇酸固定...
...免疫酶细胞化学技术可用于包埋前和包埋后染色，但以前者应用较多。...
...研究。2．染色方法的选择根据实验条件和抗体特点选择染色方法。PAP和ABC技术可以采用，但试剂价格较昂贵，步骤较复杂。我们认为间接荧光或间接酶技术即可获得满意结果。间接酶染色技术步骤如下：（1）冷酒精固定的组织石蜡包埋，组织切片，常规脱蜡后...
...分子杂交技术在电镜水平的应用中，胶体金的标记术被科技工作者认为是当前最理想的标记物（详见第二十章 ）。一、电镜水平的免疫金染色法应用于电镜水平的免疫法，可分为包埋前染色和包埋后染色，由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差，一般只用于细胞表面的抗原...
...测定570nm（RB200）和280nm（蛋白）的读数，根据Wells表算出F/P克分子比值。⑦效价高的标记抗体加0.1% NaN3或硫柳汞（0.1%）数滴防腐，分装放置20℃以下可长期保存，4℃～10℃能保存半年左右。3．染色步骤染色前...
...基因表达和调控，以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织，是一个可靠的分子生物学研究的材料来源。在石蜡切片上进行原位杂交或原位PCR分析的分子生物学方法，是免疫细胞化学技术的重要延伸。通过对DNA...
...穿透性，使标记抗体液进入细胞内。2．免疫反应处理 常用包埋前染色，分直接法和间接法两种。在染色前，将组织切成约10～20μm厚的薄片。（1）直接法：将薄片直接浸泡于标记抗体液中，室温或37℃作用1～2h或更长；缓冲液（有人提倡用冷缓冲液）浸漂，...
...显微镜下检出免疫反应阳性部位，修整组织进行后固定，最后按电镜样品制备、脱水、包埋、超薄切片、染色观察等。组织不冰冻，无冰晶形成和组织抗原破坏，在免疫组化染色前避免了组织脱水、透明、包埋等步骤对抗原的损害，能较好地保留组织内脂溶性物质和细胞膜...
...显示方法有二种：一种是用HRP显示，类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法，利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平的厚片原位杂交免疫细胞化学染色，其步骤与第二十章 叙述的原位杂交免疫细胞化学基本方法相同，只是为了减少细胞微细结构的损伤...
...nm）标记抗体直径比常用胶体金（5～40nm）及铁蛋白标记抗体（12nm）小，因而对固定组织具有更好的穿透力，可用于抗原的超威结构定位，尤其是免疫电镜的包埋前染色。结合免疫酶及不同大小胶体金标记抗体，还可用于抗的双标记及多标记。非特异性背景...
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