近些年来,流式细胞分析技术已经成为细胞生物学、肿瘤学、免疫学等基础和临床医学领域中的一项新的有效工具。本章 主要介绍流式细胞分离及分析的基石原理、流式细胞计的基本结构和操作、流式细胞术在免疫细胞化学中应用的技术思路、途径和方法,以及它们在临床医学中的应用。对FCM在外周血白细胞的免疫组织化学分析方面的应用作重点介绍。
(一)肾小球疾病发病机制的研究 应用免疫荧光或免疫酶标技术,可对肾小球内免疫复合物沉积的机制、补体系统的激活途径、凝血机制的启动等进行研究,兹分述如下: 1.免疫复合物的形成及沉积的机制 有下列三种情况: (1)抗原及抗体在血液循环中结合形成循环免疫复合物沉积于肾小球:常见于毛细血管内增生性肾小球肾炎,抗原(如链球菌、 葡萄 球菌等)侵入人体后,免疫系统产生...
SPA可为多种示踪物如荧光素、酶、胶体金、铁蛋白等所标记,应用较广的为酶标记SPA和金标记SPA技术,后者将在第七章 中叙述。标记SPA常用的酶为HRP。可应用于间接法。SPA在PAP法中可代替桥抗体。 1.SPA—HRP用于间接法的操作步骤 (1)切片经脱蜡后用0.5%H2O2—纯甲醇液处理5min以抑制内源性过氧化物酶活性。 (2)用Tris盐酸缓冲液(...
一、免疫荧光或免疫酶标技术在肾脏疾病中的应用的意义
...至1000ml,其中含CaCl2、MgCl2各1.0mmol/L。或在进入凝集素孵育前,先用该液孵育,以增强凝集素结合力。 ②和其它抗体血清应用一样, 应用每批新的凝集素实验时,都先要用缓冲液稀释成不同等级;如8,16,32,64,125,250,500,1000μg/ml,经染色选择最佳稀释度。 ③有作者认为阻断组织内源性过氧化物酶所用的H2O2对碳水化合...
在肾脏疾病时,免疫细胞化学技术主要应用于肾脏穿刺组织的检查,也可应用于血清或肾脏洗脱液及尿液的特殊检查,兹分述如下:
真皮结缔组织由数量不多的细胞和丰富的细胞外基质组成。细胞成分包括成纤维细胞、肥大细胞、巨噬细胞和少量淋巴细胞等。细胞外基质包括:①胶原:真皮中胶原纤维由I型和II型胶原构成,成熟真皮中I型胶原约占胶原的85%,越年幼的皮肤含III型胶原的比例越高。②弹性蛋白。③非胶原糖蛋白:如纤维粘连蛋白。④蛋白聚糖:为氨基聚糖(亦称糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。...
真皮结缔组织由数量不多的细胞和丰富的细胞外基质组成。细胞成分包括成纤维细胞、肥大细胞、巨噬细胞和少量淋巴细胞等。细胞外基质包括:①胶原:真皮中胶原纤维由I型和II型胶原构成,成熟真皮中I型胶原约占胶原的85%,越年幼的皮肤含III型胶原的比例越高。②弹性蛋白。③非胶原糖蛋白:如纤维粘连蛋白。④蛋白聚糖:为氨基聚糖(亦称糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。...
真皮结缔组织由数量不多的细胞和丰富的细胞外基质组成。细胞成分包括成纤维细胞、肥大细胞、巨噬细胞和少量淋巴细胞等。细胞外基质包括:①胶原:真皮中胶原纤维由I型和II型胶原构成,成熟真皮中I型胶原约占胶原的85%,越年幼的皮肤含III型胶原的比例越高。②弹性蛋白。③非胶原糖蛋白:如纤维粘连蛋白。④蛋白聚糖:为氨基聚糖(亦称糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。...
免疫细胞化学技术已被广泛应用于皮肤科学领域,尤其在皮肤科的自身免疫性疾病如 天疱疮 、 大疱性类天疱疮 、 红斑狼疮 的诊断、病情和疗效判定及发病机理的研究方面,起着重要作用。现将免疫细胞化学在皮肤病学的应用简要介绍如下。
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