原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
...合)封片。 2.对照试验可作空白,替代,一步法抑制或吸收等对照,以证明阳性结果的特异性。 3.荧光显微镜检查阳性荧光呈明亮的黄绿色荧光,抗原组织成分呈现出阳性荧光时,即证明病人有对该组织成分的自身抗体,如细胞核呈明亮的黄绿色荧光即报告抗核抗体阳性。对阳性结果根据需要可进一步作滴度检查。 近来一些报告认为用培养细胞作某些自身抗体检查,可以取得良好的效果。 在检...
原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
...合)封片。 2.对照试验可作空白,替代,一步法抑制或吸收等对照,以证明阳性结果的特异性。 3.荧光显微镜检查阳性荧光呈明亮的黄绿色荧光,抗原组织成分呈现出阳性荧光时,即证明病人有对该组织成分的自身抗体,如细胞核呈明亮的黄绿色荧光即报告抗核抗体阳性。对阳性结果根据需要可进一步作滴度检查。 近来一些报告认为用培养细胞作某些自身抗体检查,可以取得良好的效果。 在检...
原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
...合)封片。 2.对照试验可作空白,替代,一步法抑制或吸收等对照,以证明阳性结果的特异性。 3.荧光显微镜检查阳性荧光呈明亮的黄绿色荧光,抗原组织成分呈现出阳性荧光时,即证明病人有对该组织成分的自身抗体,如细胞核呈明亮的黄绿色荧光即报告抗核抗体阳性。对阳性结果根据需要可进一步作滴度检查。 近来一些报告认为用培养细胞作某些自身抗体检查,可以取得良好的效果。 在检...
Friou等(1957)首先用免疫荧光细胞化学技术检查 系统性红斑狼疮 病 人血 清中的抗核抗体后,随后,在多种自身免疫性疾病的诊断中,广泛应用了免疫细胞化学方法,为这类疾病的诊断和研究提供了重要的依据。 所谓自身免疫性疾病是指自身免疫反应引起组织损伤的疾病。在临床方面,有的自身免疫性疾病已明确是自身抗体直接作用于自身抗原产生的自身免疫应答所致;有的则难以证...
组织化学 (histochemistry)和 细胞化学 (cytochemistry)技术是通过 化学 或 物理 反应原理显示 组织切片 细胞内某种化学成分,进行定位、定量及其与功能相关的研究。如糖类、 脂类 、酶、 核酸 等与 试剂 发生化学物理反应,形成有色终末产物,在光镜下观察,有的可在电镜下观察。 1.糖类显示 多糖 和 蛋白 多糖的常用方法是 过碘...
Friou等(1957)首先用免疫荧光细胞化学技术检查 系统性红斑狼疮 病 人血 清中的抗核抗体后,随后,在多种自身免疫性疾病的诊断中,广泛应用了免疫细胞化学方法,为这类疾病的诊断和研究提供了重要的依据。 所谓自身免疫性疾病是指自身免疫反应引起组织损伤的疾病。在临床方面,有的自身免疫性疾病已明确是自身抗体直接作用于自身抗原产生的自身免疫应答所致;有的则难以证...
虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同,所不同的是:(1)杂交时需先在高温80~95℃短时处理,使DNA探针及细胞内靶DNA变性,解离成单链,迅置于冰上冷却。然后置于37℃~42℃杂交过夜。(2)RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景,因此,在操作步骤...
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