...）羊抗A种动物血清（1：100）室温30min。（4）A种动物血清PAP复合物（1：100）室温30min。（5）DAB·4HCl/H2O2(0.05%/0.01%)，室温1.5min。上述每一步骤后应用PBS洗涤（5min×3次）。（6）...
...PAP包埋前染色法（Pickel 等，1975）经固定组织、应用振动切片机（Vibratome）切35～50μm厚片，或用组织铺片，以漂浮法在反应板上进行下列步骤：（1）正常羊血清（1：30PBS稀释），室温孵育30min。（2）第一抗体（A...
...室温5min，Tris缓冲液洗涤。（6）正常羊血清1：30，室温5min。（7）兔PAP复合物，内含1%正常羊血清，室温3min,Tris 缓冲液洗涤。（8）DAB—H2O2液显色（含H2O20.01%～0.03%）,室温3min。（9）4%...
...或无。在作超薄切片前应先切半薄切片，寻出免疫反应阳性部位。根据作者经验，半薄切片可在相差显微镜下不染色进行观察（指PAP染色法），免疫反应部位呈黑点状。在HE或甲苯胺蓝染色的半薄切片上，免疫反应部位呈棕黄色。据此定位作超薄切片，可大大提高...
...复合物的配制：经试验，生物素与抗生物素之比为1：4时，能获得最佳满意效果。即抗生物素10μg/ml加2.5μg/ml生物素，应用0.05mol/l Tris—HCl液，pH7.6，在应用前30min配制。（3）ABC法的评价及实验注意事项...
...基因组探针与整装抽提的细胞进行电镜原位杂交技术，成功地证明了腺病毒DNA与核骨架的紧密结合关系，胶体金颗粒呈簇状与串珠状结合在核骨架上。向正华等（1994）应用地高辛标记探针结合HRP的包埋前染色法显示了POMc mRNA定位于神经元的粗面...
...如④。⑩干燥后在电镜下观察。（4）Lowicryl K4M快速包埋染色法（Altman等1984）①包埋剂的配制：单 体13g交联剂2g引发剂75mg②生物样品处理：除了聚合这一步骤外，下列所有步骤都在20℃进行。1）组织用3%戊二醛—3%...
...1．PAP的制备及特征 PAP复合物是离体制备的HRP抗HRP复合物，它的制备方法较多，现简介其中之一。（1）制备抗HRP血清：健康雄性家兔（2.0kg以上），可先于足跖皮下注射灭活的卡介苗（共10mg），2周后重复1次，刺激机体免疫系统...
...分子杂交技术在电镜水平的应用中，胶体金的标记术被科技工作者认为是当前最理想的标记物（详见第二十章 ）。一、电镜水平的免疫金染色法应用于电镜水平的免疫法，可分为包埋前染色和包埋后染色，由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差，一般只用于细胞表面的抗原...
...标本的制备方法 第三节 免疫酶细胞化学技术 一、基本原理 二、电镜标本制备方法 1．单层细胞培养物免疫酶染色法 2．组织切片酶标记抗体染色法 3．PAP包埋前染色法（Pickel 等，1975） 4．PAP包埋后染色法（Ordronneau...
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