...先测定荧光抗体特异性染色与非特异性染色的效价,若二者效价相差较大,则可将荧光抗体稀释至一临界浓度,使特异性染色呈阳性,而使非特异性染色保持阴性,稀释方法和染色效价测定方法相同。...
...F/P=2.4为宜。抗体工作浓度的确定方法类似ELISA间接法中酶标抗体的滴定。将荧光抗体自1:4~1:256倍比稀释,对切片标本作荧光抗体染色。以能清晰显示特异荧光、且非特异染色弱的最高稀释度为荧光抗体工作浓度。荧光抗体的保存应注意防止...
...用于活细胞染色的以F/P=2.4为宜。抗体工作浓度的确定方法类似ELISA间接法中酶标抗体的滴定。将荧光抗体自1:4~1:256倍比稀释,对切片标本作荧光抗体染色。以能清晰显示特异荧光、且非特异染色弱的最高稀释度为荧光抗体工作浓度。荧光抗体...
...染色法步骤,先用不同稀释度的荧光抗体染色,结果以抗核抗体荧光强度“++”为标准,染色用效价和直接法相同。2.非特异性染色测定根据荧光抗体的用途不同,可用相类似的抗原切片或涂片,倍比稀释荧光抗体,按常规染色,结果在标本上出现的非特异染色应显著低于...
...1.材料(1)免疫血清60℃灭活20min,用Kolmers 盐水作2倍稀释成1:2,1:4,1:8……。补体用1:10稀释的新鲜豚鼠血清,抗补体荧光抗体等,按下述的补体法染色。免疫血清补体结合的效价,如为1:32则免疫血清应作1:8稀释...
...PBS)作1:5稀释,滴加覆盖抗原切征,置湿盒中,37℃,30~60min。(3)切片用PBS洗2次,每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。(4)滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体(用0.01%伊文氏蓝稀释)覆盖...
...PBS)作1:5稀释,滴加覆盖抗原切征,置湿盒中,37℃,30~60min。(3)切片用PBS洗2次,每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。(4)滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体(用0.01%伊文氏蓝稀释)覆盖...
...自身抗体间接法相同,但在荧光抗体染色之后,要延长PBS洗涤时间,3次PBS洗涤,每次30min。封裱切片。3.荧光显微镜检查可见横纹肌A-带呈阳性荧光,无例外的都是胸腺肿瘤病人。单纯肌无力病人主要与I带和H带呈现阳性荧光有关。某些肌无力病人...
...阴性。②染色抑制试验(一步法):将荧光抗体和未标记的抗体球蛋白或血清(相同)等量混合,如上法处理切片。结果应为阴性。为证明此种染色抑制不是由于荧光抗体被稀释所致,可用盐水代替未标记抗血清,染色结果应为阳性。此法结果较二步法稳定。③类属抗原染色...
...PBS漂洗,吹干,加1∶20稀释的荧光素标记羊抗人IgG,37℃孵育30分钟,漂洗,吹干,缓冲甘油封片,荧光显微镜下观察。 判定标准:以角质层出现典型的规则的线状或板层状荧光为阳性。 IBT法(免疫印迹法)、IIF法(间接免疫荧光法):阴性。 ...
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