...用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10-7系列稀释的抗原,斑点直径0.25cm, 空气中干燥,80℃多聚甲醛蒸气固定1h,然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥...
...Pharmacia)可取代Amberlight CG-50用于纯化标记抗体(杨守京,等,1992)。三、胶体铁标记抗体的鉴定用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10...
...胶体铁的等电点为7.8至7.9,在pH7.4时通过离子键能与抗体IgG(pH5.8~7.3)结合而不影响抗体活性,在此条件下,Seno'对Hale'胶体铁进行了抗体标记,并成功用于免疫细胞化学染色(Seno,et al.1989),抗体...
...1986)。1989年日本学者Seno等在抗体分子上标记了胶体铁,将胶体铁引入免疫细胞化学技术(Seno,et al. 1989)。杨守京等在胶体的制备方法及其标记物的纯化等方面做了改进,成功地用于流行性出血热病毒抗原的检测(杨守京,等,...
...(1)组织切片脱蜡入水,0.01mol/l pH7.4 PBS洗;(2)用4%正常羊血清封闭组织37℃ ,30min。(3)分别以第一抗体孵育组织,4℃24h,PBS振洗10min×3;(4)用胶体铁标记的第二抗体37℃孵育30min或用...
...7.4,CB)稀释,即可进行抗体标记。该方法制备的铁胶体呈深红色,颗粒大小1nm左右,在pH4~8范围内稳定,4℃可存放一个月以上,室温存放半个月,阴离子定位分布同Murakami等的胶体铁,与IR-COO-有较强的亲和力,但不与IR-NH...
...感染的疾病,检查抗原或抗体,如查出IgM抗体,可做为近期接触抗原的标志,所以使用荧光标记抗IgM可诊断近期感染。除微生物学方面的应用外,还可利用单克隆抗体鉴定淋巴细胞的亚类。使用流式细胞仪(fluorescene-activated cell...
...胶体铁的呈色产物亚铁氰化铁是一络合物(解离常数1×10-35),一经形成,难以再与其它化学物质发生反应。蓝色的亚铁氰化铁与棕色的DAB产物及黑色的银颗粒颜色对比明显,因此强结合免疫酶及IGSS进行光镜下抗原的双标及多标记。胶体铁(颗粒1...
...法两大类。按照鉴定的目的和对象不同,也可分为免疫鉴定法、细胞生物学鉴定法、生物效价测定法、纯指标测定法、DNA遗传标记鉴定法、mRNA差异显示鉴定法等。免疫鉴定法是利用中药含有的特异蛋白为抗原制备的特异抗体,与供试品种特异抗原结合产生沉淀...
...Ab;②标记一种抗体,就能与一种以上的相应抗原结合鉴定多种抗原或抗体;③敏感性比直接法高。缺点:①参加反应因素多,易出现非特异性反应;②实验方法复杂。(3)补体结合法:是标记补体抗体的方法,第一步是将抗体和补体加入反应体系;第二步是加入标记...
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