...抗血清不会互相干扰，在应用一抗和二抗时都可将两种血清一次混合使用，将四步减少为两步。4．金标记抗原检查法（Gold—labelled antigen detection method, GLAD 法）此法是Larson（1977）年首先提出的，...
...）PBS冲洗5min×2次。（6）5%醋酸铀水溶液染色，水洗。（7）枸椽柄铅染色。（8）电镜观察。三、胶体金双标记技术（常用为蛋白A—胶体金）1．单面法以不同直径的金粒分别标记两种不同的抗体，以间接法先染第一种抗体，洗净后再染第二抗体。2．...
...（1）胶体金液的制备，应用枸椽酸三钠还原法（见第五章 ）。（2）待标记蛋白质和金溶液的准备，同前。注意点是用0.2mol/l K2CO3将金溶液pH调至5.9～6.2之间。（3）确定胶体金与蛋白A的结合用量比例。取一系列盛有0.1ml...
...相互排斥而不能互相结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀，常用牛血清白蛋白，卵白蛋白，聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 （丙烯葡聚糖S—400）层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的...
...Geuze对该法进行了改良，特点是通过改变鞣酸的用量制备出多种颗粒直径的胶体金，而且颗粒的直径均匀一致，很适合于双标及多标研究。制备3nm、5nm、10nm、15nm的胶体金颗粒见表5-3。表5-3 鞣酸—柠檬酸三钠还原法A 液B 液直径（nm）...
...相互排斥而不能互相结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀，常用牛血清白蛋白，卵白蛋白，聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 （丙烯葡聚糖S—400）层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。...
...（1959）也发现类似现象，并将其命名为A抗原。直到1963年Lofkvist等分离了该抗原，并证明它是一种蛋白质。为与A与糖相区别，Grov（1960）将其命名为葡萄球菌蛋白A，简称SPA或蛋白A（Protein A）。由于SPA的一些...
...文献报告应用较多的是植物凝集素—胶体金免疫标记技术，常用的如刀豆球蛋白（Con A）-- 胶体金免疫标记技术，如第六章 所述，Con A 能与细胞膜中的甘露糖结合，能标记内质网膜、核被膜以及细胞膜的EF面，有助于糖蛋白在超微结构水平的定位。为...
...胶体金颗粒见表5-3。表5-3 鞣酸—柠檬酸三钠还原法A 液B 液直径（nm）1%柠檬酸钠（ml）0.1mol/L K2CO3ml1%鞣酸（ml）H2O（ml）1%HAuCl4（ml）H2O（ml）...
...还原材料，常用还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据还原剂类型以及还原作用的强弱，可以制备0.8nm～150nm不等的胶体金。最常用的制备方法为柠檬酸盐还原法。具体操作方法如下：（1）将HauC14先配制成0.01％水溶液...
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