1.HRP标记凝集素法 适用于小量的凝集素标记(Ponder 1983)。 (1)HRP的活化 ①将10mg HRP(SigmaType VI)溶解在1ml 0.3mol/L 的重碳酸钠溶液中(1.25g/50ml)。 ②加50μl含1%氟二硝基苯的无水乙醇溶液,室温轻度搅拌1h。 ③加1ml含0.06mol/L的过碘酸钠的蒸馏水(0.62g/50ml),室...
凝集素 (Lectin)是指一种从各种植物,无 脊椎动物 和高等动物中提纯的 糖蛋白 或结合糖的 蛋白 ,因其能 凝集 红血球(含 血型物质 ),故名凝集素。常用的为 植物凝集素 (Phytoagglutin,PNA),通常以其被提取的植物命名,如 刀豆素 A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin,WGA)...
植物凝集素最早发现于1888年,Stillmark在蓖麻(Ricinus communis L.)籽萃取物中发现了一种细胞凝集因子,它具有凝集红细胞的作用。它是一类具有特异糖结合活性的蛋白,具有一个或多个可以与单糖或寡糖特异可逆结合的非催化结构域。根据植物凝集素亚基的结构特征,植物凝集素分成4种类型:部分凝集素、全凝集素、嵌合凝集素、超凝集素;根据氨基酸序列...
冷凝集素 (cold agglutinin)是冷反应型抗红 细胞 抗体 ,在O一4℃时最易和红 细胞膜 抗原 结合,是IgM型,是较强的 凝集 红细胞 的一种可存在于正常人 血清 中的抗体,低效价一般没有临床意义。 参考范围 : 效价 <1:32. 临床评价 : 1、一般认为, 病毒 和其他微生物 感染 产生的 免疫反应 的副产物中就有冷凝集素,但常人并不发...
外源凝集素 (Lectins)又称植物性 血细胞凝集 素(Hemagglu-tinins),是植物合成的一类对 红细胞 有凝聚作用的 糖蛋白 .外源凝集素可 专一性 结合碳水化合物.当外源凝集素结合人肠道上皮 细胞 的碳水化合物时,可造成 消化道 对营养成分吸收能力的下降.外源凝集素广泛存在于800多种植物(主要是 豆科植物 )的种子和荚果中.其中有许多种是...
植物血球凝集素 (PHA) phytohemagg lutinin 对原来从植物中发现的,具有 凝集 红血球作用的物质,而命名的,后来发现了很多具有同样作用的物质,扩大其含义为 细胞 凝集素 中植物来源的总称—— 植物凝集素 (phytoagglutinin,plant agglutinin)或凝集素(lectin)的同义词涵义模糊。缩写pHA的多数是指从菜...
冷凝集素综合征 是由于自身反应性 红细胞凝集 及冷诱导因素导致慢性 溶血性贫血 和 微循环 栓塞 为特征的一组 疾病 。 冷凝集素综合征的病因 (一)发病原因 本病可以是原发的或继发的。原发病例原因不明,继发病例见于 支原体肺炎 、 传染性单核细胞增多症 ,此外,少见于 淋巴系统 肿瘤 ,如 慢性淋巴细胞白血病 、 淋巴瘤 及 骨髓瘤 等。 (二)发病机制 ...
凝集素的特性及标记原理详见第五章 ,近年来,凝集素电镜标记技术应用日益广泛,且获得较为满意的效果。凝集素电镜标记技术方法较多,常用的有凝集素—酶(常用为HRP)、凝集素—生物素—酶电镜标记技术。现将凝集素—酶电镜标记技术(包埋前染色)简介如下(Sterit 和Kreatzberg,1987)。 (1)固定:常用为PLP或多聚甲醛—戊二醛固定液。如为取脑组织,...
凝集素可为荧光素、酶和生物素等所标记,分别进行下列染色法: 1.直接法 标记物直接标记在凝集素上,使之直接与切片中的相应糖蛋白或糖脂相结合。 (1)切片脱蜡至水。 (2)凝集素标记物(100μg/ml),室温,30min。 (3)TBS洗3次,每次2min。 (4)如为荧光素标记物,封片用荧光显微镜观察。如为酶标记物,则应依次进行呈色、 脱水 、透明和封固后...
一般认为细胞膜上特定的糖基可用以区别细胞的类型和反映细胞在分化、成熟和肿瘤细胞性变中的变化。仅在某些特殊的例子,其细胞结合凝集素的性能可以预先估计,如双花 扁豆 素之于血型A物质的特异性,荆豆凝集素之于血型O物质2—L—岩藻糖的特异性,然而在绝大多数情况下,关于由凝集素所识别的碳水化合物决定簇的种类,关于携带决定簇的分子的性质和机能,完全凭实验经验去发现。 ...
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