...此法适用于小量抗体的荧光素标记，标记简便，非特异性染色较少。（1）用0.025mol/L碳酸盐缓冲液pH9.0，将欲标记免疫球蛋白稀释成1%浓度，装入透析袋中。（2）用同一缓冲液将FITC配成0.1mg/ml的溶液，按1%球蛋白液体积的10...
...的蛋白质溶液装入透析袋中，置于含FITC的0.01mol/LpH9.4碳酸盐缓冲液中反应过夜，以后再对PBS透析法去除游离色素。低速离心，取上清。标记完成后，还应对标记抗体进一步纯化以去除未结合的游离荧光素和过多结合荧光素的抗体。纯化方法可...
...用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。1．免疫荧光技术 免疫荧光技术（...
...可用于双标记示踪研究。化学结构式如下（图3-10）。图3-9 TMRITC在可见光区的吸收光谱和发射光谱图3-10 TMRITC结构式二、荧光素标记抗体的方法（一）FITC标记抗体的方法1．Marsshall 氏法（1）材料：抗体球蛋白溶液...
...通常染色、着色较弱时，应想办法改进标本的处理的抗原的保存，提高抗体的穿透力，再重新染色。但有时组织本身抗原含量较少或标本难得（如手术材料），可尝试下述方法以提高染色强度，确保染色成功。1．重复显色一般认为，对ALP标记抗体，延长显色时间其...
...方法为：先将待标记的蛋白质溶液装入透析袋中，置于含FITC的0.01mol/LpH9.4碳酸盐缓冲液中反应过夜，以后再对PBS透析法去除游离色素。低速离心，取上清。标记完成后，还应对标记抗体进一步纯化以去除未结合的游离荧光素和过多结合荧光素...
...在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用罗达明标记，可采用以下染色方法：1．一步法双染色 先将两种标记抗体按适当比例混合（A+B），按直接法进行染色。2．二步法双染色 先用RB...
...胶体铁的等电点为7.8至7.9,在pH7.4时通过离子键能与抗体IgG(pH5.8～7.3)结合而不影响抗体活性,在此条件下,Seno＇对Hale＇胶体铁进行了抗体标记,并成功用于免疫细胞化学染色(Seno,et al.1989),抗体...
...FITC）标记抗体的具体步骤详见第三章 。在标记络丹明B200（lissamine rhodamin B200,RB200）时应注意：（1）PCI5极易吸收水份放出烟雾样刺激气体，RB200和丙酮混合后搅拌时也放出有毒的SO2Cl刺激性气体，故...
...FITC的异硫氰酸基在水溶液中与免疫球蛋白的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键，成为标记荧光免疫球蛋白，即荧光抗体。反应式如下（图3-6）：一个Ig分子上最多能 标记15～20个FITC分子。图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱图3-6 抗体的...
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