...标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下:DEAE-纤维素柱的装柱,洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所需DEAE-纤维素量以干重每克交换20~50mg标记蛋白量为宜。常用梯度洗脱法如下:(1)...
...溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6。柱长与直径之比为5-15,样品体积...
...除游离荧光素可用2×46cm柱层析法,详细方法参阅第二章 。加入荧光抗体15~18ml(按床体积的5%~10%加样),使其缓慢渗入柱内,待即将全部入柱时,加入PBS少许,关闭下口,停留30~40min ,使游离荧光充分进入细筛孔中,然后再...
...一种情况,有些蛋白质和其他蛋白质处于一种结合状态,如甲胎蛋白常和白蛋白相结合,因此免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白杂抗体存在。一、除去杂抗体有两种方法:1.亲和层析法将交叉杂抗原交联到琼脂糖珠4B上,如除去抗白蛋白抗体,则交联上白蛋白或不含...
...一种情况,有些蛋白质和其他蛋白质处于一种结合状态,如甲胎蛋白常和白蛋白相结合,因此免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白杂抗体存在。一、除去杂抗体有两种方法:1.亲和层析法将交叉杂抗原交联到琼脂糖珠4B上,如除去抗白蛋白抗体,则交联上白蛋白或不含...
...+后可再用。如仅用小量荧光抗体,可用1×20cm的柱层析柱,取2g Sephadex G-50装柱,即可过滤2~3.5ml荧光抗体。(四)DEAE纤维素柱层析法标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下:...
...45min,弃上清。5.进一步分离各种胶原可用分段盐析和柱层析法进行操作。(二)胶原的分段盐析1.取初级提取物加0.1mmol/L乙酸,加NaCl至0.7mmol/L,15kr/min离心20min。沉淀提取Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,上清提取Ⅳ、Ⅴ型...
.../min离心45min,弃上清。5.进一步分离各种胶原可用分段盐析和柱层析法进行操作。(二)胶原的分段盐析1.取初级提取物加0.1mmol/L乙酸,加NaCl至0.7mmol/L,15kr/min离心20min。沉淀提取Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,上...
...纤维素(OH-型)柱对枸杞制药废渣粗多糖有很好的脱色纯化作用。 3.3 根据吉林枸杞制药废渣总多糖在DEAE纤维素(OH-型)和葡聚糖凝胶G-200两个柱上的洗脱曲线均为宽峰且有裂分,故可初步判断该总多糖不止含有1种多糖。 3.4 纸层色谱与...
...纤维素(OH-型)柱对枸杞制药废渣粗多糖有很好的脱色纯化作用。 3.3 根据吉林枸杞制药废渣总多糖在DEAE纤维素(OH-型)和葡聚糖凝胶G-200两个柱上的洗脱曲线均为宽峰且有裂分,故可初步判断该总多糖不止含有1种多糖。 3.4 纸层色谱与...
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