...采用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性(RFLP),即PCR-RFLP技术从基因水平检测ApoE基因多态性(基因型),操作简便、快速准确。1.仪器与试剂(1)仪器:电泳仪、基因扩增仪;(2)试剂:Taq DNA聚合酶、dNTPs、...
...ApoE基因。ApoE2与Ⅲ型高脂蛋白血症相关,而ApoE4在老年性痴呆病(Alzheimer's disease)患者中的出现率较高。这后一发现开拓了人们的视野,即ApoE不仅在脂类代谢中至关重要,而且在其他的代谢过程中也扮演重要角色。已有...
...无例外的均为E2/2表型,易早发严重的AS。V型HLP患者ApoE4含量比正常人高。CHD患者E4/3表型和E4基因频率明显高于正常对照组。ε4与高TC、高LDL-C和高ApoB水平密切相关,可能是高胆固醇血症和CHD的遗传易患因子。4....
...ApoE三种主要异构体的氨基酸残基及基因密码的改变位置由于ApoE多态性具有生物学重要性,对ApoE多态性的研究是目前医学的热门话题。ApoE表型和基因型的检测方法很多,多年来先后采用等电聚焦电泳和基因分析术进行检测。目前从基因水平研究ApoE...
...DNA序列的突变;或直接对某基因的片段进行DNA序列测定,与正常的相应的DNA序列比较,检测有否突变发生。这几种方法为较常使用的方法。有关这些方法的详细介绍可参见本书第十六章的生物化学检验技术篇。本节主要介绍ApoB,ApoE,Apo(a)...
...末端的检测表明,191残基以外羧基端存在三个螺旋,其中两个为A型(203~223和225~266),第三个(268~289)为一种G型螺旋。与脂类或不同的脂质微粒或二甲基磷脂酰胆碱结合的结果说明,G螺旋和第二螺旋的末端在脂质连结,在ApoE的...
...ApoE表型检测即可以以VLDL为样品,又可以直接以血清(或血浆)为样品,通过IEF电泳分析、双向PAGE或结合免疫印迹法进行测定。1.等电聚焦(IEF):由于三种主要ApoE异构体E2、E3和E4的等电点(pⅠ)分别为5.89、6.02...
...~8范围的梯度作IEF电泳,则几乎能检测出至今为止所发现的所有异构体表型。国内吕新跃等应用自制E6C3株ApoE单克隆抗体作为一抗,用兔抗鼠IgG-辣根过氧化物酶标二抗,建立微量脱脂血清IEF及免疫印迹检测ApoE表型,亦取得较好效果。...
...没有发现ApoB的VNTR多态性与血浆胆固醇、甘油三酯、ApoB等水平有关。3.信号肽(SP)多态性的检测ApoB基因5’信号肽(SP)由27个(插入型Ins)或24个(缺失型Del)氨基酸组成,可经PCR扩增后直接分析,用于PCR的引物序列...
...Ⅳ基因丛参与调节血浆胆固醇及甘油三酯的代谢。2.ApoEⅠ-CⅠ-CⅡ基因限制性片段长度多态性位于第19对染色体上的ApoEⅠ-CⅠ-CⅡ基因丛也有多态性的存在。检测出其RFLP的限制性内切酶包括:HpaⅠ、TaqⅠ、BglⅡ、DraⅠ、...
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