...以ApoB基因第26个外显子MspⅠ RFLP为例,具体介绍检测的方法和步骤,笔者对湖北地区健康成人(120例)进行了检测。(一)材料引物(如前所述),TaqDNA聚合酶、dNTP、限制性内切酶MspⅠ、高速离心机、基因扩增仪、恒温水浴箱...
...ApoB基因多态性研究较多的有RFLP、VNTR、SP多态性,分别叙述如下:1.RFLP的检测ApoB有10种RFLP,一般采用PCR-RPLPs方法进行分析,研究较多的有第26外显子XbaⅠ、MspⅠ位点,第29外显子EcoRⅠ位点,在...
...对ApoB基因多态性进行检测、分析的方法很多,如:限制性内切酶的酶谱分析法,PCR直接分析法,PCR产物RFLP分析法,等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交法等等,其中最多用且简单的方法有PCR产物直接分析法和PCR产物RFLP分析法。...
...Peacock等提出Ins/del多态性与冠心病的发展,即其严重程度有关,也有报道Ins/del多态性在冠心病与对照组中无明显差别。三、ApoB基因多态性检测方法举例以ApoB基因第26个外显子MspⅠ RFLP为例,具体介绍检测的方法和...
...DNA序列的突变;或直接对某基因的片段进行DNA序列测定,与正常的相应的DNA序列比较,检测有否突变发生。这几种方法为较常使用的方法。有关这些方法的详细介绍可参见本书第十六章的生物化学检验技术篇。本节主要介绍ApoB,ApoE,Apo(a)...
...多态性并非存在,纯属DNA序列测定错误。表4-3列举了10种RFLP。产生这些RFLP的突变或发生在ApoB基因上游启动子区域,或发生在内含子区域,或在外显子区域。表4-3 ApoB基因限制性片段长度多态性举例惹限制性内切酶酶切位点突变...
...DNA序列的突变;或直接对某基因的片段进行DNA序列测定,与正常的相应的DNA序列比较,检测有否突变发生。这几种方法为较常使用的方法。有关这些方法的详细介绍可参见本书第十六章的生物化学检验技术篇。本节主要介绍ApoB,ApoE,Apo(a)...
...从分子水平研究ApoB,阐明动脉粥样硬化及高脂血症的发病机理,寻找其遗传标志受到广泛重视,现已发现:ApoB基因具有明显的多态性,其核苷酸变异有75处,其中导致氨基酸变异的有54处,例如多种酶限制性片段长度多态性(RFLPs),3’端高变区...
...与以上介绍的ApoB、ApoE、Apo(a)以及ApoAI的基因一样,其他载脂蛋白的基因也存在多态性,以下简要地列举一些例子。1.ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因限制性片段长度多态性在ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因丛内,使用XmnⅠ、ApaⅠ、...
...)蛋白质的多态型是由Apo(a)基因中Kringle-4的数目变化而引起的。Kring-4基因片段含有几个稀少的限制性酶切部位(NotI,SfiI.KspI,Sval,KpnI),这为加速筛选Apo(a)基因的多态性提供了帮助。表4-5列举...
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