...非同位素标记物很多例如:生物素(biotin),地高辛(Digoxigenin),汞(mercury),溴(bromine)和碱性磷酸酶等,其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用,能成功地显示一些...
...坚膜定影液10min。(30)自来水冲洗15min。(31)切片温箱烤干,脱水,透明,封片。结果:蛋白或多肽免疫反应阳性细胞为棕色胞质,而其相应mRNA为黑色银颗粒聚集。二、非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法非同位素标记物很多例如:生物素...
...PBS固定5min 。(6)PBS冲洗2×3min。(7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L 三乙醇胺配)10min。(8)2×SSC冲洗10min。(9)杂交:如是cDNA探针用前需进行变性处理,载片法时将切片在空气中晾干,加含探针的杂交...
...创造了原位杂交细胞或组织化学技术。Orth(1970)应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交,首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位,但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞,探针均采用同位素标记。...
...探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交,首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位,但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞,探针均采用同位素标记。由于同位素标记探针具有放射性既污染环境,又对人体有害,且受半衰期限制等缺点,科学工作者们...
...原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。...
...异常,如异硫氰酸荧光素(FITC)和罗丹明200结合,前者显示黄绿色,后者显示红色,ABC-DAB显示法与地高辛-碱性磷酸酶系统相结合,前者反应物为棕色,后者为紫蓝色。这种联合应用法又叫多靶点原位杂交法(multiple-target ISH...
...是组织细胞已经合成的物质(过去时),本身不能说明阳性组织细胞目前的功能状态,亦无法预测细胞将合成何种物质,发挥什么功能,因此,单纯的ICC法存在着被动性。近年来,ICC法与原位杂交技术结合,使细胞内活性DNA可视化,直接显示某染色体上,何种...
...应用 一、DNA探针的应用 二、寡核苷酸探针的应用 第四节 原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法 一、同位素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合程序 二、非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法 第五节 原位杂交免疫细胞化学技术的未来与展望 一、...
...中的应用 三、地高辛标记cRNA探针的应用 第三节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用 一、DNA探针的应用 二、寡核苷酸探针的应用 第四节 原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法 一、同位素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合...
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