...杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时，即可开始检测特异性抗体，筛选出所需要的杂交瘤细胞系。在选择培养期间，一般每2～3天换一半培养液。2．抗体的检测 检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同，选择不同的筛选方法，一般以快速、简便、特异、敏感...
...1．杂交瘤细胞的冻存 及时冻存原始孔的杂交瘤细胞每次克隆化得到的亚克隆细胞是十分重要的。因为在没有建立一个稳定分泌抗体的细胞系的时候，细胞的培养过程中随时可能发生细胞的污染、分泌抗体能力的丧失等等。如果没有原始细胞的冻存，则可因上述意外而...
...杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中，可能会有数个甚至更多的克隆，可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体（特异性抗体）分泌细胞和其它无关抗体的...
...饲养细胞层的96孔板内，每孔加100μl。一般一个免疫脾脏可接种4块96孔板。⑦将培养板置37℃、5%CO2培养箱中培养。（三）选择杂交瘤细胞及抗体检测1．HAT选择杂交瘤细胞 脾细胞和骨髓瘤细胞经PEG处理后，形成多种细胞的混合体，只有脾...
...某些人源的细胞因子如hIL-2对小鼠细胞起作用，但鼠源性的IL-2对人的细胞则无刺激作用。生物学检测的方法大致可分为增殖或增殖抑制、集落形成、直接杀伤靶细胞、保护靶细胞免受病毒攻击、趋化作用以及抗体形成法等几类。（一）增殖或增殖抑制法其...
...获得几乎所有抗原的单克隆抗体，只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。这种用杂交瘤技术制备的单克隆抗体可视为第二代抗体。单克隆抗体由于纯度高、特异性强、可以提高各种血清学方法检测抗原的敏感性及特异性，但单克隆抗体多为双价抗体，与抗原结合不易交联为...
...半月后，改用RPM1-1604完全培养液，均处于37℃环境；⑤单克隆抗体细胞株筛选；当杂交瘤细胞长满孔穴的1/3时，即可对培养液中的抗体检测，连续2次呈阳性孔穴，要立即克隆到预先加腹腔细胞（104/孔）的96孔板中，每孔含有一个杂交瘤细胞，...
...半月后，改用RPM1-1604完全培养液，均处于37℃环境；⑤单克隆抗体细胞株筛选；当杂交瘤细胞长满孔穴的1/3时，即可对培养液中的抗体检测，连续2次呈阳性孔穴，要立即克隆到预先加腹腔细胞（104/孔）的96孔板中，每孔含有一个杂交瘤细胞，...
...某些疾病的发病机制、监视疾病的发生、发展过程和指导临床治疗有重要意义。目前的检测方法，大多限于用免疫学技术检测其数量，而有关分子的亲和力及扩散速率的检测正在建立中。一、细胞表面粘附分子的检测1．放射免疫测定法通常用抗细胞粘附分子抗体包被载体，...
...替代物用于基础和临床医学研究。一、抗独特抗体的制备（一）抗原及其用量的选择由于Ab2是针对Ab2Id的抗体，因而制备Ab2时应选择适当的Ab1作为免疫原。所用抗原的用量依照给予抗原的种类、次数、途径以受体动物的耐受性而有所不同。一般来说，当受体...
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