...（1）胶体金液的制备，应用枸椽酸三钠还原法（见第五章 ）。（2）待标记蛋白质和金溶液的准备，同前。注意点是用0.2mol/l K2CO3将金溶液pH调至5.9～6.2之间。（3）确定胶体金与蛋白A的结合用量比例。取一系列盛有0.1ml...
...SPA致敏绵羊红血球，与经IgG处理的细胞形成玫瑰花环，来鉴定带Fc受体的细胞，反之，如用SPA抑制玫瑰花环形成，则可定量测定细胞表面的IgG。应用SPA与胶体金或铁蛋白相结合，可在电镜水平检查抗原抗体反应的定位。特别是蛋白A—胶体金技术（...
...在电镜水平应用较为广泛，因该法具有特异性中、灵敏度高、方法简便和背景染色淡等优点。蛋白A的免疫特异性在第五章 已作了介绍，PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg ...
...共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性，PAg复合物分子最小易于穿透组织。1．蛋白A—金（PAg）复合物的制备（Slot 和Geuze,1981）（1）胶体金液的制备，应用枸椽酸三钠还原法（见第五章 ）。（2）待标记蛋白质...
...复合物相连接。复合物是将过氧化酶结合在生物素上、再将生物素—过氧化酶连接物与过量的抗生物素蛋白反应而制备的（图6-1），最后进行显色反应定位。图6-1 ABC法（2）操作步骤①冰冻切片或石蜡切片均可。②冰冻切片可用丙酮固定10min左右，...
...Geuze对该法进行了改良，特点是通过改变鞣酸的用量制备出多种颗粒直径的胶体金，而且颗粒的直径均匀一致，很适合于双标及多标研究。制备3nm、5nm、10nm、15nm的胶体金颗粒见表5-3。表5-3 鞣酸—柠檬酸三钠还原法A 液B 液直径（nm）...
...强，An－toni A区的瘤细胞中S—100蛋白呈均匀地分布于胞浆和核内，而Antoni B区的瘤细胞排列疏松，S—100蛋白染色不规则，纤维化区缺乏S—100蛋白；神经纤维瘤中可见S—100蛋白阳性和阴性两种细胞，显示它们的来源可能不同，...
...（一）免疫金的特性胶体金可以和蛋白质等各种大分子物质结合，在免疫组织化学技术中，习惯上将胶体金结合蛋白质的复合物称为金探针。用于免疫测定时胶体金多与免疫活性物质（抗原或抗体）结合，这类胶体金结合物常称为免疫金复合物，或简称免疫金（...
...吸附等处理，除去杂质后应用。其制备方法分一步法和两步法；基本原理相同，是使戊二醛的两个醛基之一与酶蛋白的赖氨酸结合，另一醛基与免疫球蛋白上的氨基结合，将酶连结于抗体上。（1）一步法：将酶、抗体、戊二醛按一定比例混合，经透析除去标记物中剩余的...
...结果能使酶具有多个醛基，从而能与多个蛋白分子的氨基相结合，成为一些大分子的聚合物。因此，有作者强调指出，对要求具有较强的细胞穿透力的免疫细胞化学实验时应予以考虑是否适用。但国内有实验室应用上海生物制品所产生的应用过碘酸氧化法制备的HRP—...
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