...除游离荧光素可用2×46cm柱层析法，详细方法参阅第二章 。加入荧光抗体15～18ml（按床体积的5%～10%加样），使其缓慢渗入柱内，待即将全部入柱时，加入PBS少许，关闭下口，停留30～40min ，使游离荧光充分进入细筛孔中，然后再...
...溶液中的低分子量杂质，可以用凝胶层析法除去，这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6。柱长与直径之比为5-15，样品体积...
...1 试剂1.1 琼聚糖4B凝胶。1.20.2mol /L 氯化钠溶液，pH7.0洗脱液。1.3 蓝色葡聚糖2000（2～4mg）加维生素B12（0.2mg），加蒸馏水1ml溶解。2 仪器2.1 层析柱（1.5～1.6×100cm）。2.2...
...1 试剂1.1 琼聚糖4B凝胶。1.20.2mol /L 氯化钠溶液，pH7.0洗脱液。1.3 蓝色葡聚糖2000（2～4mg）加维生素B12（0.2mg），加蒸馏水1ml溶解。2 仪器2.1 层析柱（1.5～1.6×100cm）。2.2...
...标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下：DEAE-纤维素柱的装柱，洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所需DEAE-纤维素量以干重每克交换20～50mg标记蛋白量为宜。常用梯度洗脱法如下：（1）...
...反复更换凝胶的上层液，以除去其中的杂质及过细的胶粒。 (2) 装柱 于柱A内加满水，接上加胶管B，然后于充分泡胀的凝胶中加入约为凝胶容量1／4体积的水，搅拌均匀后，沿管壁装入加胶管中，加胶管与贮液瓶C相连,用水流洗，葡聚糖凝胶G－100流速为...
...离子交换层析法固定相是离子交换剂，各组份与离子交换剂亲和力不同凝胶层析法固定相是多孔凝胶，各组份的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度不同亲和层析法固定相只能与一种待分离组份专一结合，以此和无亲和力的其它组份分离表16-7 按操作形式不同...
...高效液相层析法等。现以碘标记蛋白为例，说明以上各种方法的适用情况。1．凝胶过滤法常用的是SephadexG系列，也有Biogel—P系列。分离标记蛋白与无机碘时，通常用Sephadex G—25或G—50，然后用G—100进一步纯化。2．...
...1．葡聚糖凝胶的某些技术数据种类干颗粒直径（μ）分子量分级范围床体积毫升/克干分子筛得水值溶胀最少平衡时间（h）柱头压力（kPa）(2.5cm直径柱)肽及球形蛋白质葡聚糖（线性分子）室温沸水浴Sephadex G-1040～ 120～...
...标题色谱法附录序号附录Ⅴ内容全文 色谱法 色谱法（又称层析法）根据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。吸附色谱法是利用被分离物质在吸附剂上被吸附能力的不同，用溶剂或气体洗脱使组分分离；常用的吸附剂有氧化铝、硅胶...
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