...根据重组载体的标志来筛选,可以筛选去大量的非目的重组体,但还只是粗筛,例如细菌可能发生变异而引起抗药性的改变,却并不代表目的序列的插入,所以需要做进一步细致的筛选。...
...基本原理加以介绍。一、根据重组载体的标志作筛选最常见的载体携带的标志是抗药性标志,如抗氨芐青霉素(anpr)、抗四环素(terr)、抗卡那霉素(kanr)等。当培养基中含有抗生素时,只有携带相应抗药性基因载体的细胞才能生存繁殖,这就把凡未能...
...分离纯化出来,这才便于重组操作。⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。常用的载体有质粒,噬菌体和病毒等。...
...一部分是含有目的序列的重组体(recombinant)。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆,所以筛选(dcreening)是基因克隆的重要步骤。在构建载体,选择宿主细胞、设计分子克隆方案时都必须仔细考虑筛选的问题。以下就常用技术的...
...日前,第四军医大学西京医院全军骨科研究所和第二炮兵总医院骨科共同完成的一项研究表明,卵磷脂可以作为重组人骨形态发生蛋白-2的一种新载体材料。 骨缺损和骨不连是骨科的难题之一,常用的治疗手段是骨移植术,但各种骨移植术都有一定的局限性,因此...
...应当具有良好的标志可供识别和筛选,常用有抗药性和α互补蓝白筛选标志等。为获得目的基因克隆,可构建生物的基因组文库,完整的基因组文库是含有该生物全部遗传信息的克隆集合体,从基因组文库中可以克隆得该生物的基因组基因;以mRNA为模板经反转录酶催化...
...应当具有良好的标志可供识别和筛选,常用有抗药性和α互补蓝白筛选标志等。为获得目的基因克隆,可构建生物的基因组文库,完整的基因组文库是含有该生物全部遗传信息的克隆集合体,从基因组文库中可以克隆得该生物的基因组基因;以mRNA为模板经反转录酶催化...
...分离纯化出来,这才便于重组操作。⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。常用的载体有质粒,噬菌体和病毒等。一、质粒载体质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质...
...条件,包括在细胞中复制必需的复制起始序列、筛选标志如抗药性基因等。图20-12中绘出几种常用的表达载体例子。pBV220是我国科学工用者自己构建的表达载体,使用了很强的PRPL双启动子,含有编码温度敏感性阻遏蛋白的cI857基因,在30-32...
...条件,包括在细胞中复制必需的复制起始序列、筛选标志如抗药性基因等。图20-12中绘出几种常用的表达载体例子。pBV220是我国科学工用者自己构建的表达载体,使用了很强的PRPL双启动子,含有编码温度敏感性阻遏蛋白的cI857基因,在30-32...
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