...了解和选择。总的说来核酸的分离与纯化是在溶解细胞的基础上,利用苯酚等有机溶剂抽提(核酸溶于缓冲液,即水相),分离,纯化;乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀,收获。溶解细胞的方法因标本不同而不同,有用SDS加NaOH,有用蛋白酶,有的用超声波破碎等方法...
...Sephadex)等种类。由于凝胶过滤技术设备简单、操作方便,重复性能好和样品得率高等特点。广泛应用于生命科学领域,如蛋白质、核酸、多糖氨基酸、激素和抗生素等物质的分离纯化。凝胶层析在载脂蛋白的分离纯化中,属于使用最多的技术手段。凝胶过滤装置...
...Sephadex)等种类。由于凝胶过滤技术设备简单、操作方便,重复性能好和样品得率高等特点。广泛应用于生命科学领域,如蛋白质、核酸、多糖氨基酸、激素和抗生素等物质的分离纯化。凝胶层析在载脂蛋白的分离纯化中,属于使用最多的技术手段。凝胶过滤装置...
...自身凝血酶III)。现有的PCC分离纯化方法主要为直接从血浆中用凝胶吸附和低温乙醇沉析并经凝胶吸附,其中直接从血浆中用凝胶吸附的方法又分为经典的批式吸附法和半流动吸附法。由于血浆中抑制凝血因子活化的一些天然抑制剂会被乙醇所灭活,从而使...
...目的基因后,可用以下方法大量扩增制备:①用体外DNA重组技术与载体DNA相连,转化至大肠杆菌中进行无性繁殖。以氯化铯超速离心纯化重组质粒DNA,并以合适限制性内切酶消化,经凝胶电泳制备回收特异的目的核酸片段。②聚合酶链式反应(Poly-...
...高效液相层析法等。现以碘标记蛋白为例,说明以上各种方法的适用情况。1.凝胶过滤法常用的是SephadexG系列,也有Biogel—P系列。分离标记蛋白与无机碘时,通常用Sephadex G—25或G—50,然后用G—100进一步纯化。2....
...为了探讨不同器官保存液保存胰腺对胰岛分离、纯化及功能的影响,以成人胰腺为研究对象,分别以高渗枸橼酸钾溶液(HC-A液)与威斯康新大学器官保存液(UW液)灌洗、保存胰腺,进行胰岛分离及纯化,比较两组分离、纯化后收获的胰岛数及胰岛当量数(...
...上述各种方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,...
...研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类...
...研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类...
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