标记生物素—抗生物素技术(Labelled Avidin—Biotin technique, LAB技术)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

生物素标记体作第一抗体,酶标记生物素作为第二抗体(图6-3)。操作步骤如下: 图6-3 LAB技术 (1)切片在含有25~50μg/ml生物素标记抗体(PBS液稀释)中孵育1h,室温。 (2)PBS洗2次,每次5min。 (3)用20~50μg/ml过氧化物酶标记的抗生物素液孵育90min,水洗。 (4)酶呈色反应。 BRAB法和LAB示是Guesdo...

http://qihuangzhishu.com/969/168.htm

生物素生物素—过氧化酶复合物技术Avidin Biotin–Peroxidase Complex technique, 简称ABC技术)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与LAB法和BRAB法不同的是第一抗体不为标记物所标记生物素标记的第二抗体与ABC复合物相连接。复合物是将过氧化酶结合在生物素上、再将生物素—过氧化酶连接物与过量的抗生物素蛋白反应而制备的(图6-1),最后...

http://qihuangzhishu.com/969/166.htm

生物素生物素技术(Bridged AvidinBiotin technique, 简称BRAB技术)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

技术方法是用生物素分别标记体和酶,然后以抗生物素为桥,把两者连接起来(图6-2)。 图6-2B RAB技术 检查抗原时,先用生物素标记的抗体与细胞(或组织内)的抗原反应,洗去未结合的抗体,加入抗生物素孵育后,洗去未结合的抗生物素,再加入已标记酶的生物素孵育,洗片,以细胞化学方法呈色反应。

http://qihuangzhishu.com/969/167.htm

生物素蛋白

生物素蛋白 avidin 存在于卵白中的碱性 糖蛋白 ,因它贪婪地(avidly)与生物素结合,故有此名(avidin)。给动物以生的卵白则产生 生物素缺乏 症,因为 生物素 蛋白 与生物素结合,使之 失活 。分子量为68300,含4个 亚单位 。在体外( 试管 中)对含生物素的酶具有特异的抑制作用。 在生蛋清里,含有大量抗生物素蛋白,与生物素结合可使其难...

http://zhongyibaodian.net/a/75022.html

生物素-补骨脂素(Biotin -psoralen)标记法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

生物素- 补骨脂 素是另一种生物素光敏物质,在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应,加成到DNA中,去除小分子后,得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA,及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法:取DNA或片段0.5μg加50μlTE(pH8.0)缓冲液中,再加入5μlg生物素- 补骨脂 素,溶解后,置365nm紫外光下直接照射...

http://qihuangzhishu.com/969/521.htm

应用生物素标记DNA探针电镜原位杂交技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)基本原理 应用DNA探针缺口翻译(nick translation)方法,通过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种:一种是用HRP显示,类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法,利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...

http://qihuangzhishu.com/969/565.htm

生物素缺乏

生物素 起 二氧化碳 转运 辅酶 的作用,因此为脂肪与 碳水化物 代谢 所必需. 缺乏 生鸡蛋中含有一种生物素的 拮物 --- 抗生物素蛋白 .长期食用生鸡蛋 蛋白 可引起 皮炎 和 舌炎 ,每天给生物素150~300μg便能迅速治愈.长期进行完全 胃肠外营养 而未补充生物素可出现缺乏.

http://zhongyibaodian.net/a/121746.html

生物素生物素免疫细胞化学染色法_《实用免疫细胞与核酸》_【中医宝典大全】

...起明显的“维生素H缺乏症”,也称为“蛋白质伤害”。经研究发现,在鸡蛋白中含有一种碱性蛋白,分子量为68000,属于糖蛋白,当时命名为卵白素(Avidin),卵白素具有4个同维生素H(Riotin,又名生物素)亲合力极高的结合点。给动物饲以大量鸡蛋白所致的维生素H缺乏,就是由于卵白素和大量的维生素H结合所致。维生素H(以下统称生物素)是一种小分子的维生素,分子...

http://zhongyibook.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-9-1.html

营养学/泛酸与生物素

B族 维生素 中尚有 泛酸 及 生物素 ,它们具有很重要的 生理 功能,但由于来源广泛,人体未发现有典型的缺乏病例。 5.13.1 泛酸 泛酸是 丙氨酸 藉肽键与α,γ-二羧-β-β- 二甲基 丁酸 缩合而成,它是 辅酶A (CoA)及 酰基载体蛋白 (acyl carrier protein, ACP )的组成部分。机体内的泛酸,几乎都用以组成辅酶A及AC...

http://zhongyibaodian.net/a/a-hf/162538.html

生物素标记核酸探针方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

生物素标记的核苷酸是最广泛使用的一种,如生物素-11-dUTP,可用缺口平移或末端加尾标记法。实验发现生物素可共价连接在嘧啶环的5位上,合成TTP或UTP的类似物。在离体条件下,这种生物素化dUTP可作为大肠杆菌多聚酶I(DNA酶I)的底物掺入带有缺口的DNA或RNA,得到生物素标记的核酸探针。这种标记方法称为缺口平移法。用标记在DNA上的生物素与链霉亲合素...

http://qihuangzhishu.com/969/519.htm

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