...可以在3’端标记上一个生物素。寡核苷酸35S的3’—末端标记法:将下列液体依次加入Eppendorf管中。寡核苷酸(1 pmol)1μl10×Tailingbuffer 2μl[α-35S]2μl双蒸馏水14μl末端脱氧核苷酸酶1μl(10...
...DNA的方法有缺口平移法和随机引物延伸法。3.寡核苷酸的生物素末端标记 有5’-磷酸的化学标记法和3’-OH的酶促标记法。前者将寡核苷酸的5’-磷酸接上一个乙二胺,然后用琥珀酰亚胺生物素,将生物素基团连接在磷酸酰胺基上。后者是用末端转移将...
...可能: 1.卵细胞第一次减数分裂失败或第一极体与卵子的融合(Ⅰ型) 表现为肿瘤组织与宿主细胞染色体着丝粒标记均为杂合性;而染色体末端同工酶位点表现为杂合性或纯合性,则取决于染色体着丝粒与末端标记在减数分裂时是否发生互换及互换的频率,如不发生...
...染色体着丝粒与末端标记在减数分裂时是否发生互换及互换的频率,如不发生互换则表现为末端标记杂合性,发生1次互换则50%表现为杂合性,如发生2次互换则75%表现为杂合性。 (2)第2次减数分裂失败或第二极体与卵子的融合(Ⅱ型):表现为畸胎瘤...
...显影法用于DNA断裂的定性分析。这种方法比广泛使用的溴乙啡啶染色法效果好,可增加检测凋亡DNA的敏感性。原位凋亡的检测则使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿苷-生物素缺口末端标记的组织病理染色法。 Vijayan博士等发现:在安慰剂...
...标记技术有:缺口平移;DNA快速末端标记;用T4多核苷酸酶标记DNa5'末端,随引物延伸;聚合酶链反应。核酸探针的非放射性标记技术有:光促生物素标记核酸、酶促生物素标记核酸、寡核苷酸的生物素末端标记、酶标DNA、酶标寡核苷酸、DNA半抗原标记。...
...Stoflet等报道在结构基因前加上噬菌体T7的启动子,当然也可用于DNA片段的末端标记或引入特定的点突变。末端可加碱基的数量与引物的长短有关,当引物足够长时扩增产物或末端甚至可以加上十几个到几十个碱基。...
...比活性高达108cpm(每分钟计数)/μg的32P标记DNA。用缺口平移法标记的DNA探针能满足大多数杂交要求。2.DNA快速末端标记 大肠杆菌DNA聚合酶i 经枯草杆菌蛋白酶切割可得到两条多肽链,其中分子量为76kd的大片段称为...
...酰-e-氨基乙酸化学合成法同上 N-羟基丁二酰亚胺脂 酶标亲合素或酶标抗生物素抗体显色 生物素肼化学合成法酶标亲合素或酶标抗生物素抗体显色酶微过氧化物酶直接法或合成法直接底物显色或用酶标抗体+ 底物显色 碱性磷酸酯酶直接法或合成法同上荧光素...
...(G-50)柱层析回收。二、末端标记法在大肠杆菌T4噬菌体多聚核苷酸激酶(T4PNK)的催化下,将γ-32P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为:此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物...
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