...（1）将整封染色体铺片放置于金网上，在70%的酒精蒸汽固定4～15h，空气干燥。（2）以强碱使DNA变性，将金网置于2×SSC内（应用0.1n NaOH调整至pH12），室温，2min。（3）脱水，以70%和95%酒精各冲洗3次，空气干燥...
...保存较好；（3）与放射性同位素原位分子电镜杂交技术的信/噪比例相近。是目前公认在电镜水平应用同位素标记原位杂交技术较为理想的方法。胶体金颗粒电子密度高，明显地区别于非特异性染色与污染，能达到较为满意的超微结构定位。本技术的难点在于：①实验...
...内质网上。下面列举几种代表性的电镜原位杂交技术。一、应用同位素标记cRNA探针电镜原位杂交技术于染色体制片（Hutchison et al,1982）（1）将整封染色体铺片放置于金网上，在70%的酒精蒸汽固定4～15h，空气干燥。（2）以强碱...
...probes）已被成功的用于原位杂交实验。图20-2 示cDNA转录为cRNA，可标记以不同的标记物，然后与细胞中的mRNA相结合。Biotin(生物素)，Au(金)，digo-（地高辛）一、同位素标记cRNA探针在ISHH中的应用（一）组织...
...组织处理及预杂交等步骤与本章 中叙述的放射性同位素标记cRNA探针相同，但由于地高辛标记cRNA探针在原位杂交细胞化学中已愈来愈得到广泛的应用，我们在基本方法中仍较详细的叙述其操作过程。1．组织前处理在组织制片中以冷冻切片（厚10～30μm）...
...创造了原位杂交细胞或组织化学技术。Orth（1970）应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交，首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位，但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞，探针均采用同位素标记。...
...获得反意RNA探针(cDNA);③依照待测核酸的核苷酸序列，应用DNA合成仪合成寡聚核苷酸探针。cRNA和cDNA的常用标记物有32S、32P、3H等放射性核素和荧光素、生物素、地高辛等非放射性物质。组织学应用的原位杂交术主要是染色体...
...原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外，又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。...
...基因组探针与整装抽提的细胞进行电镜原位杂交技术，成功地证明了腺病毒DNA与核骨架的紧密结合关系，胶体金颗粒呈簇状与串珠状结合在核骨架上。向正华等（1994）应用地高辛标记探针结合HRP的包埋前染色法显示了POMc mRNA定位于神经元的粗面...
...原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外，又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。...
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