T4DNA连接酶也能催化限制性内切酶切割产生DNA平末端的连接。如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用,用不同的限制性内切酶切割后的粘性末端不能互补结合,则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端,再用T4DNA连接酶连接,但平末端连接要比粘性末端连接的效率低得多。
如果目的序列两端有与载体上相同的限制性核酸内切酶位点,则同一限制酶切开产生的粘末端,在降低温度退火时,能重新互补结合,在DNA连接酶催化下,目的序列就与载体DNA链相连接(见图20-5)。 图20-5 同一限制酶切割DNA粘性末端的连接 不同的限制性内切酶切,如果产生的DNA的粘末端相同,也同样可用此法连接,如识别6bp序列的BamHⅠ和识别4bp序列的Sa...
当一种 限制性内切酶 在一个特异性的 碱基 序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的 核苷酸 片断,即5’突出。这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连,或者通过 分子 内反应环化。因此称这些片断具有粘性,叫做 粘性末端 。 高中教材中也作“黏性末端”。
当一种 限制性内切酶 在一个特异性的 碱基 序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的 核苷酸 片断,即5’突出。这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连,或者通过 分子 内反应环化。因此称这些片断具有粘性,叫做 粘性末端 。 高中教材中也作“黏性末端”。
末端重复 terminal repetition,terminal redundancy 指线 状 噬菌体 的双螺旋DNA中所见的构造,即其 分子 两端具有相同的 基因 排列或 碱基 排列。如果把基因排列用1,2,……等数字来表示,T1,T7噬菌体等的DNA两端如(1)所示末端重复是一定的,而T 偶数噬菌体 和P1噬菌体等DNA两端如(2)所示其末端重复是不...
粘着连接 :(adherens junctions, zonula adherens) 在斑块连接中,如果连接作用涉及 细胞质 中的骨架部分是 肌动蛋白 ,这种连接方式称为粘着连接。 根据粘着连接涉及的是两个 细胞 间的连接还是细胞与细胞外 基质 的连接,又分为两种情况:若涉及相邻两细胞间的连接,则称为粘着带(adhesion belt), 如果是细胞同细胞...
ligase 又称 合成酶 ,能 催化 两个 分子 连接成一个分子或把一个分子的首尾相连接的酶。此反应与ATP的分解反应相 偶联 。在把两分子相连接的同时发生 三磷酸腺苷 (ATP)的 高能磷酸键 的断裂如DNA 连接酶 等。 连接酶是酶分类中重要的一类(EC 6):6.1形成C-O键;6.2形成C-S键;6.3形成C-N键;6.4 形成C-C键。 连接酶的...
ligase 又称 合成酶 ,能 催化 两个 分子 连接成一个分子或把一个分子的首尾相连接的酶。此反应与ATP的分解反应相 偶联 。在把两分子相连接的同时发生 三磷酸腺苷 (ATP)的 高能磷酸键 的断裂如DNA 连接酶 等。 连接酶是酶分类中重要的一类(EC 6):6.1形成C-O键;6.2形成C-S键;6.3形成C-N键;6.4 形成C-C键。 连接酶的...
ligase 又称 合成酶 ,能 催化 两个 分子 连接成一个分子或把一个分子的首尾相连接的酶。此反应与ATP的分解反应相 偶联 。在把两分子相连接的同时发生 三磷酸腺苷 (ATP)的 高能磷酸键 的断裂如DNA 连接酶 等。 连接酶是酶分类中重要的一类(EC 6):6.1形成C-O键;6.2形成C-S键;6.3形成C-N键;6.4 形成C-C键。 连接酶的...
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