...mol/L，不能低于10～15μmol/L。四种dNTP的浓度应相同，其中任何一种浓度偏高或偏低，都会诱导聚合酶的错误掺入，降低合成速度，过早终止反应。决定最低dNTP浓度的因素是靶序列DNA的长度和组成，例如，在100μl反应体系中，4×...
...（一）DNA聚合酶（DNa polymerase）的作用是将1个脱氧三磷酸核苷酸加到引物（primer）的3’-OH上，释放出一个焦磷酸分子（ppi），如下式表示。聚合酶主要有以下几种：1．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大肠杆菌DNA聚合酶（E....
...单核苷酸是三磷酸核苷酸，合成时磷酸键水解释放出能量，以供核酸的合成。表1－2 三磷酸核苷酸的种类及符号DNARNA腺嘌呤脱氧三磷酸核苷酸（dATP）腺嘌呤三磷酸核苷酸（ATP）鸟嘌呤脱氧三磷酸核苷酸（dGTP）鸟嘌呤三磷酸核苷酸（GTP）胞嘧啶...
...脱氧胸腺嘧啶核苷酸(dTMP)是由脱氧尿嘧啶核苷酸(dUMP)甲基化生成。而dUMP由dUTP水解生成：体内进行此种“浪废”能量的反应过程的意义在于：细胞必须减少细胞内dUTP浓度以防止脱氧尿嘧啶掺入DNA中，因为合成DNA的酶系不能有效...
...已发现有三种不同的核糖核苷酸还原酶，此反应过程较复杂。核糖核苷酸还原酶催化循环反应的最后一步是酶分子中的二硫键还原为具还原活性的巯基的酶再生过程。硫氧化还原蛋白(thioredoxin)是此酶的一种生理还原剂，由108个氨基酸组成，分子量约...
...大多数并不使用DMSO。（二）四种脱氧三磷酸核苷酸（4×dNTPs）在PCR反体系中dNTP终浓度高于50mmol/L会抑制Taq酶的活性，使用低浓度dNTP可以减少在非靶位置启动和延伸时核苷酸错误掺入，高浓度dNTPs易产生错误掺入，而...
...ADA的基因位于第20号染色体长臂。大多数患儿ADA突变仅为CpG二核苷酸CT点突变，整个基因或部分基因缺失仅见于少数病例。 （二）发病机制 ADA缺乏患者的脱氧腺苷和脱氧三磷酸腺苷等毒性中间代谢产物的堆积损伤淋巴细胞，能在4天内溶解T细胞和...
...次黄嘌呤核苷酸是最重要的核苷酸，并由此转变成其他嘌呤核苷酸；也可由此分解代谢产生次黄嘌呤、黄嘌呤及尿酸。另一重要步骤是依靠次黄嘌呤-鸟嘌噙磷酸核糖转移酶（HGPRT）将次黄嘌呤及鸟嘌呤转变成这二种嘌噙的核苷酸，借此控制尿酸的产量。当这种酶缺乏...
...合成终止，产生短的DNA链。具体测序工作中，平行进行四组反应，每组反应均使用相同的模板，相同的引物以及四种脱氧核苷酸；并在四组反应中各加入适量的四种之一的双脱氧核苷酸，使其随机地接入DNA链中，使链合成终止，产生相应的四组具有特定长度的、...
...。此反应为嘧啶合成的限速步骤。ATCase是限速酶，受产物的反馈抑制。不消耗ATP，由氨基甲酰磷酸水解供能。表8－1 两种氨基甲酰磷酸合成酶的比较氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ氨基甲酰磷酸合成酶Ⅱ分布线粒体现肝脏）胞液（所有细胞）氮源氨谷氨酰胺变构...
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