...（1）Igg 10ml (6mg/ml)在0.01mol/l pH9.5碳酸盐缓冲液中透析过夜。（2）将四甲基异硫近氰酸罗达明（每毫克IgG加入5～20μg）溶于二甲亚砜（1mg/ml）,取此溶液300μl，一滴一滴加入蛋白质溶液中，同时...
...于4℃备用。（三）四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法（1）Igg 10ml (6mg/ml)在0.01mol/l pH9.5碳酸盐缓冲液中透析过夜。（2）将四甲基异硫近氰酸罗达明（每毫克IgG加入5～20μg）溶于二甲亚砜（1mg/ml）,取...
...异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、0.01mol/l Ph8.0磷酸盐缓冲盐水、1%硫柳汞、离心机及离心管、三角烧瓶（25ml）、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、烧杯（500ml）、透析袋、棉线、玻棒等。（2）方法及步骤：①抗体准备：用0～4℃pH...
...取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol...
...它是一种紫红色粉末，较稳定。其最大吸收光谱为550nm，最大发射光谱620nm，呈橙红色荧光，与FITC的黄绿色荧光对比清晰（图3-9），与蛋白质结合方式同TITC。它可用于双标记示踪研究。化学结构式如下（图3-10）。图3-9 ...
...FITC的异硫氰酸基在水溶液中与免疫球蛋白的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键，成为标记荧光免疫球蛋白，即荧光抗体。反应式如下（图3-6）：一个Ig分子上最多能 标记15～20个FITC分子。图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱图3-6 抗体的...
...异硫氰酸罗达明（tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC） 二、荧光素标记抗体的方法 （一）FITC标记抗体的方法 （二）四乙基罗达明标记抗体方法 （三）四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法 （四）藻红蛋白...
..., RB200） ◦ （三）四甲基异硫氰酸罗达明（tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC） 二、荧光素标记抗体的方法 ◦ （一）FITC标记抗体的方法 ◦ （二）四乙基罗达明标记抗体方法 ◦ （...
...在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时，要进行双重荧光染色，一般均采用直接法，将两种荧光抗体（如抗A和抗B）以适当比例混合，加在标本上孵育后，按直接法洗去未结合的荧光抗体，抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记，发黄绿色荧光；抗B抗体用...
...在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用罗达明标记，可采用以下染色方法：1．一步法双染色 先将两种标记抗体按适当比例混合（A+B），按直接法进行染色。2．二步法双染色 先用RB...
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