...(1)Igg 10ml (6mg/ml)在0.01mol/l pH9.5碳酸盐缓冲液中透析过夜。(2)将四甲基异硫近氰酸罗达明(每毫克IgG加入5~20μg)溶于二甲亚砜(1mg/ml),取此溶液300μl,一滴一滴加入蛋白质溶液中,同时...
...取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min(在通风橱中)。然后加入10ml无水丙酮,放置5min,不断搅拌。过滤,用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上,4℃干燥保存。取抗体(20mg/ml)每毫升加入生理盐水和0.5mol...
...柱层析分布(二)四乙基罗达明标记抗体方法取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min(在通风橱中)。然后加入10ml无水丙酮,放置5min,不断搅拌。过滤,用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上,4℃干燥保存。取抗体(20mg/...
...碱性条件下易与蛋白质的赖氨酸ε-氨基反应结合而标记在蛋白分子上。化学反应式如下(图3-8)。图3-7 RB200在可见光区的吸收图3-8 RB200标记抗体反应光谱和荧光光谱...
...在同一标本上有两个抗原需要同时显示(如A抗原和B抗原),A抗原的抗体用FITC标记,B抗原的抗体用罗达明标记,可采用以下染色方法:1.一步法双染色 先将两种标记抗体按适当比例混合(A+B),按直接法进行染色。2.二步法双染色 先用RB...
...用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原,用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。1.免疫荧光技术 免疫荧光技术(...
...棒、棉线及烧杯(500ml)、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等。(2)方法及步骤:①抗体的准备:取适量已知球蛋白浓度之溶液,置入三角烧瓶中,加入生理盐水及碳酸盐缓冲液,使最后蛋白浓度为20mg/ml,缓冲液容量为总量的1/...
...异硫氰酸罗达明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC) 二、荧光素标记抗体的方法 (一)FITC标记抗体的方法 (二)四乙基罗达明标记抗体方法 (三)四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法 (四)藻红蛋白...
..., RB200) ◦ (三)四甲基异硫氰酸罗达明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC) 二、荧光素标记抗体的方法 ◦ (一)FITC标记抗体的方法 ◦ (二)四乙基罗达明标记抗体方法 ◦ (...
...胶体铁的等电点为7.8至7.9,在pH7.4时通过离子键能与抗体IgG(pH5.8~7.3)结合而不影响抗体活性,在此条件下,Seno'对Hale'胶体铁进行了抗体标记,并成功用于免疫细胞化学染色(Seno,et al.1989),抗体...
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