...非同位素标记物很多例如:生物素(biotin),地高辛(Digoxigenin),汞(mercury),溴(bromine)和碱性磷酸酶等,其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用,能成功地显示一些...
...杂交后冲洗中适当减低漂洗温度。一、同位素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合程序(1)切片入PBS冲洗5min,最好是将切片漂洗于灭菌器皿中。(2)0.1mol/L 甘氨酸PBs 5min。(3)0.4%Triton X-100 PBS 15...
...PBS固定5min 。(6)PBS冲洗2×3min。(7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L 三乙醇胺配)10min。(8)2×SSC冲洗10min。(9)杂交:如是cDNA探针用前需进行变性处理,载片法时将切片在空气中晾干,加含探针的杂交...
...应用 一、DNA探针的应用 二、寡核苷酸探针的应用 第四节 原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法 一、同位素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合程序 二、非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法 第五节 原位杂交免疫细胞化学技术的未来与展望 一、...
...创造了原位杂交细胞或组织化学技术。Orth(1970)应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交,首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位,但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞,探针均采用同位素标记。...
...中的应用 三、地高辛标记cRNA探针的应用 第三节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用 一、DNA探针的应用 二、寡核苷酸探针的应用 第四节 原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法 一、同位素原位杂交组化与免疫组化PAP法的联合...
...少量游离HRP,亦不影响其稳定性。2.PAP染色原理及步骤(1)原理:与酶桥法相似,都是借助桥抗体将酶连结在与组织抗原结合的第一抗体上,所不同的是PAP法将酶桥法的步骤3、4合并为1,用PAP复合物代替,即第三步用PAP复合物孵育切片,故称...
...细胞的染色体铺片或切片进行DNA-DNA原位杂交,其杂交定位以荧光法、放射自显影或免疫组化法显示。目前ICA已广泛应用于生前诊断、肿瘤组织活检材料的诊断和基因异常的诊断。在肿瘤细胞方面,在乳腺癌,神经系统肿瘤、睾丸肿瘤,妇科肿瘤和膀胱肿瘤等均...
...探针与兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交,首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位,但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞,探针均采用同位素标记。由于同位素标记探针具有放射性既污染环境,又对人体有害,且受半衰期限制等缺点,科学工作者们...
...原位杂交组化(ISHH)与免疫组织化学(IHC)结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色,这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原,从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。...
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