...而较高的反应温度有助于消除RNA的二级结构。一步法扩增（one step amplification）是为了检测低丰度mRNA的表达，利用同一种缓冲液，在同一体系中加入逆转录酶、引物、Taq酶、4种dNTP直接进行mRNA反转录与PCR扩增...
...min，然后按前述PCR方法进行DNA扩增。在应用PCR方法检测RNA病毒时，首先应将RNA转化成cDNA才能进行扩增，因为PCR只能对DNA模板进行扩增，我们把这种RNA的PCR反应称为反转录PCR，简称RT-PCR。把由RNA转化成DNA的...
...保存的（如子宫颈涂片或涂片）具有实用价值。十、反转录PCR方法检测RNARNA的多聚酶链式反应（RT-PCR）是以RNA为模板，联合逆转录反应（reverse transcrip－tion, RT）与PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中...
...直接供作序列分析和分子克隆，摆脱繁琐的基因方法，可直接从RNA或染色体DNA中或部分DNA已降解的样品中分离目的基因，省去常规方法中须先进行克隆后再作序列分析的冗繁程序。已固定的和包埋的组织或切片亦可检测。如在PCR引物端事先构建一个内切酶...
...1．DNA-PCR定量用同位素标记的探针与电泳分离后的PCR扩增产物进行杂交，根据放射自显影后底片曝光强弱可以对模板DNA进行定量。Abbot等利用这种方法对人类T细胞白血病反转录基因进行了定量研究。PCR扩增产物用专为检测ds-DNA而...
...1970年Temin等在致癌RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶，该酶以RNA为核板，根据碱基配对原则，按照RNA的核苷酸顺序(其中V与A配对)合成DNA。这一过程与一般遗传信息流转录的方向相反，故称为反转录，催化此过程的DNA聚合酶...
...英国的研究者称，干细胞移植后进行定量的反转录多聚酶链反应（RT－PCR）有助于慢性髓细胞性的进一步治疗。 伦敦Hammersmith 医院的Eduardo Olaverria 及其同事解释说：“RT－PCR已经广泛地应用于异基因干细胞移植...
...AMV逆转录酶。⒀ 42℃保温30～60min,然后93℃5min.⒁ 立即置冰浴中冷却，备用。由上述方法制得的RNA反转录样品，通过10%聚丙烯酰胺凝胶电泳可鉴定其特异性。二、PCR扩增步骤（一）引物的设计与合成HIV PCR引物设计应遵寻...
...1970年Temin等在致癌RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶，该酶以RNA为核板，根据碱基配对原则，按照RNA的核苷酸顺序(其中V与A配对)合成DNA。这一过程与一般遗传信息流转录的方向相反，故称为反转录，催化此过程的DNA聚合酶...
...检测可用PCR方法检测病毒的RNA，也可检测抗体。 抗-HCV是非中和抗体，是HCV感染的标志，抗-HCV的存在一般表示有传染性。高效价的抗-HCV阳性，常与HCV现存感染有关，如能同时查到HCV-RNA即可确诊病毒复制和有传染性。在疾病的...
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