固定 酶反应 的其它条件,在不同pH处测定酶反应速度,可得各种类型的 酶活性 与pH关系见图17-3A。 图17-3A 酶活性与pH的函数关系曲线可能具有的几种形状 最常见的是(a)的对称钟形曲线,少数的如(b)(c)在一侧即偏酸或偏碱处活性最高。 生化 学家将酶活性最高处的pH称为最适pH。一般来说, 血清 中大多数酶最适pH接近中性(pH6.5-7.5)...
固定酶反应的其它条件,在不同pH处测定酶反应速度,可得各种类型的酶活性与pH关系见图17-3A。 图17-3A 酶活性与pH的函数关系曲线可能具有的几种形状 最常见的是(a)的对称钟形曲线,少数的如(b)(c)在一侧即偏酸或偏碱处活性最高。生化学家将酶活性最高处的pH称为最适pH。一般来说,血清中大多数酶最适pH接近中性(pH6.5-7.5)。有些酶在最适p...
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。 弱酸 及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc), 弱碱 及其盐的混合溶液(如NH3.H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。 由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本...
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。 弱酸 及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc), 弱碱 及其盐的混合溶液(如NH3.H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。 由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本...
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。 弱酸 及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc), 弱碱 及其盐的混合溶液(如NH3.H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。 由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本...
在建立某一ELISA测定中,应对包被抗原或抗体的浓度和酶标抗原或抗体的浓度予以选择,以达到最合适的测定条件和节省测定费用。下面以间接法测抗体和夹心法测抗原为例,介绍最适工作浓度的选择方法。 (一)间接法测抗体 1.酶标抗抗体工作浓度的选择 (1)用100ng/ml人IgG进行包被,洗涤。 (2)将酶标抗人IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温...
(一)亨德森方程式 在缓冲溶液例如HOAc-NaOAc溶液中,有以下的离解平衡: 等式两边各取负对数,则 即 HOAc的离解度比较小,由于溶液中大量的OAc-对HOAc所产生的 同离子效应 ,使HOAc的离解度变得更小。因此上式中的[HOAc]可以看作等于HOAc的总浓度[ 共轭 酸](即缓冲溶液中共轭酸的浓度)。同时,在溶液中NaOAc全部离解,可以认为溶...
采用酶 偶联 法测定 酶活性 浓度时,反应体系必须加入指示酶,有些方法还加用辅助酶,在选择或设计此类方法时,必须考虑合适的酶和浓度,有关问题将在后面“连续监测法酶活性浓度”一节中详加讨论。
(一)亨德森方程式 在缓冲溶液例如HOAc-NaOAc溶液中,有以下的离解平衡: 等式两边各取负对数,则 即 HOAc的离解度比较小,由于溶液中大量的OAc-对HOAc所产生的同离子效应,使HOAc的离解度变得更小。因此上式中的[HOAc]可以看作等于HOAc的总浓度[共轭酸](即缓冲溶液中共轭酸的浓度)。同时,在溶液中NaOAc全部离解,可以认为溶液中[O...
这一项包括几种因子,其中最重要的是 底物 种类和浓度,这是每种测 酶活性 浓度方法中首先需要选择的项目,选择恰当与否,对该酶测定至关重要。后面几项则不是每种酶测定都会遇到的选择。 (一)选合适的底物种类和浓度 如所测的酶 专一性 不强,可作用于多种底物,首先就需决定选择哪一类底物作为测此酶的底物。如该项酶测定主要用于临床诊疗工作,则首先应考虑选有较高诊断价值...
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