...一、国内实验室应用试剂配制(一)培养液(1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。(2)小牛血清商品:成都生物制品厂。...
...细胞分裂停止于中期,低渗处理使细胞膨胀,细胞膜破裂,染色体分散,这样就可便于分析。简意流程图:(2)操作过程①采血:无菌干针筒从静脉取血1~2ml,用肝素抗凝(约每毫升全血内含肝素100单位)。②培养液配制:RPMI 1640 4ml小牛血清...
...段A/T碱基的成份多,则Giemsa染料易与它结合成深染;另一段G/C碱基的成份多,则Giemsa染料不易与其结合,结果成淡染,由于整条染色体上A/T和G/C的分布不匀,这样在染色体上呈现出深浅不一的条纹或者称带纹,该技术用Giemsa染色...
...较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。1. 4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)试剂:多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/...
...浓度0.025%,消化10min。(5)蒸馏水洗净胰酶。(6)Giemsa染色20min。(7)蒸馏水洗净染色液,晾干镜检。4℃低温胰酶处理片子,其优点是:时间较长,易掌握。配制1次试剂可用1~2个月。(三)高分辨染色体G带技术1.原理常规...
....标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)生物素标记终止液:(四)DNA探针标记常用试剂的配制(1)10 ×缺口平移缓冲液...
...的变化,但要分析肿瘤细胞的核型只有在细胞培养以后。细胞培养时细胞的高度分裂指数和细胞的生长会导致染色体物质的丢失,而且核型分析不能显示特异性DNA探针的原位杂交技术,能够检测在细胞分裂间期细胞核内染色体数量和结构的异常变化。因此,这项技术又...
...(一)抗体的制备这是免疫细胞化学技术的首要试剂,必需制备具有很高特异性和敏感性的高效价抗体,这将在本书第二章 中详述。目前国内外市场各种特异性抗体日益增多,许多实验室直接应用市售产品,现在我国自制抗体种类少,发展抗体生产十分必要。尤其要...
...杂交前准备 二、关于探针的标记 三、固定剂 四、LB培养基 五、小量质粒提取主要液体 六、杂交前处理 七、杂交用液 八、杂交后漂洗溶液 九、原位杂交信号显示 附录三 全血细胞培养染色体技术常用试剂配制 一、国内实验室应用试剂配制 二、...
...试剂及处理 一、杂交前准备 二、关于探针的标记 三、固定剂 四、LB培养基 五、小量质粒提取主要液体 六、杂交前处理 七、杂交用液 八、杂交后漂洗溶液 九、原位杂交信号显示 附录三 全血细胞培养染色体技术常用试剂配制 一、国内实验室应用试剂...
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