...光敏DNP由一连接臂组成,一端是2,4-二硝基苯,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)DNA不心变性,必须溶于水中,取2~10μg10μ...
...八、光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法光敏DNP由一连接臂组成,一端是2,4-二硝基苯,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)...
...min(10000r/min)吸去上层仲丁醇,弃去。再加入仲丁醇25μl,重复提取游离的光敏生物素。吸去上层无色仲丁醇后,加入5μl 3mol/L醋酸钠,充分混匀,加入冷无水酒精100μl充分混匀,沉淀标记DNA,置-20℃过夜(或-70℃...
...Shroyer(1982)报道用2,4二硝基苯甲醛(DNP)标记DNA探针,使该DNA探针具有抗原性,然后用兔抗DNP的抗体来识别杂交后的探针,最后经免疫过氧化物酶的方法来定位杂交探针。这两种方法至今仍有采用,但因敏感度不够高,应用不够普遍。...
...生物素-补骨脂素是另一种生物素光敏物质,在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应,加成到DNA中,去除小分子后,得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA,及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法:取DNA或片段...
...Bio-11–dUTP加于其3’-OH端(脱去一个焦磷酸)。4.酶标DNA 标记试剂是辣根过氧化酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)。通过对苯醌(PBQ)与聚乙烯亚胺(PEI)连接而成(HRP-PBQ-PEI+),此试剂在戊二醛的作用下与变性的...
...引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。化学修饰法是将不同标记物用化学方法连接到DNA分子上,方法简单,成本低,适用于大量制备(>50μ...
...(一)光敏生物素标记cRNA探针的应用以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20...
...光敏反应所致。 医生说,有些药物服用后,在光照刺激下,可能引发人体过敏性反应,这类药物叫做光敏性药物。光敏反应一年四季都可发生,但夏天因光照强相对会出现多一点。出现光敏反应必须具备两个条件:一是吃过或注射过具有光敏感性的药物;二是接受了一定量...
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